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moshangchenx

金虫 (正式写手)

[求助] 菌液PCR出现奇怪现象,急求大神解释 已有4人参与

各位大虾,本人在做菌液PCR时出现了一种奇怪现象,在试管中摇菌菌液PCR结果正常,但将该管中的菌液扩大培养后,菌液PCR扩不出目的条带,出现了比目的条带小很多的带,急求大神指点!

菌液PCR出现奇怪现象,急求大神解释
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科研无止境,我心成蹉跎
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liug268

金虫 (小有名气)

首先建议确定下菌落PCR引物的设计,是设计在载体上还是设计在目的片段上,如果设计在目的片段上建议将引物在细菌基因里比对一下,否则可能有假阳性。如果是设计在载体上,那建议换用酶切的方法验证克隆,或者如果用的是非重组缺陷的菌种还有可能插入的片段被改变了……当然要先确定你的目的片段的确有那么大……
15楼2014-06-06 09:16:37
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