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疯狂的麦子

无虫 (小有名气)


[资源] 植物激素ABA提取相关问题

我想用Elisa方法测定植物根系中的ABA含量,具体怎么操作,我前面查到了一些方法,说的不是很明白。
我查到的方法
1g冷冻芽样

8ml 80%甲醇冰浴研磨,4℃浸提过夜

离心(10000rpm,4℃ 15min)→→→→→→→→→→→残渣
↓                                                                                ↓
↓                                                          甲醇悬浮,离心(10000rpm,4℃ 15min)
↓                     合并                      ↓
上清液←←←←←←←←←←←←←←←←←←←←←  上清液
↓加PVPP0.3g(吸附色素)
离心(10000rpm,4℃ 15min)

上清液过C18柱

甲醇液

N2吹干
因为我做的是根方面的应该没有叶绿素干扰,主要就是上清液合并后再次离心过完c-18固相萃取柱后,方法上写了个甲醇液,然后氮气吹干?这是什么意思,甲醇液是干什么的在这里怎么加是再次湿润柱子么?另外氮气吹干?吹的是什么? 一般过完柱子有的方法上也是说转移到离心管中氮气吹干,咋吹?一直吹到没有液体么?然后储存在-20摄氏度保存。有液体不会冻住么,没液体还怎么用Elisa测定啊?跪求大神指导一下啊。
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2016byy

铜虫 (初入文坛)


就是用氮吹仪吹干,我是吹到没有液体,甲醇-20℃是不会冻住的。
10楼2016-11-06 19:04:53
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asasaas2006

铁虫 (初入文坛)


★★★★★ 五星级,优秀推荐

引用回帖:
10楼: Originally posted by 2016byy at 2016-11-06 19:04:53
就是用氮吹仪吹干,我是吹到没有液体,甲醇-20℃是不会冻住的。

请问,氮吹的时候,温度流速怎么设定?急!

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11楼2016-12-19 22:53:26
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suyanmeng

捐助贵宾 (正式写手)


这里甲醇是冲洗C18小柱,让上清液充分回收,才能保证过了小柱激素损失更少。把过了小柱得到的液体,拿去氮吹,是浓缩样本,激素含量一般都浓缩,要不相应值太低,到时检测不到。常规的浓缩是用旋转蒸发仪,但是这个需要大体量的样本与试剂

发自小木虫IOS客户端
16楼2018-12-02 07:33:24
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mazhq1988

金虫 (正式写手)


现在都是拿液质联用测植物激素的呀,酶联免疫很没说服力,不是很靠谱,选择要慎重

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18楼2019-04-30 23:00:22
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皇猪2楼
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gurong3楼
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xueyingk6楼
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dyyyyy14楼
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dyyyyy15楼
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chambinsg17楼
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