24小时热门版块排行榜    

查看: 2862  |  回复: 23

547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
一桶稀泥(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励热心回帖交流 2014-05-29 13:11:14
多下载几个序列分析看看,确认下是不是正常都有这28bp的2个重复序列。然后再判断其他的。实在需要得到有重复序列的基因,省事的话就是委托合成,自己做的话就参考18楼的在重复序列两端分别设计加入BsaI之类内切酶的引物,扩增上下游2个都带了重复序列的片段,再酶切连接得到目的序列。
为什么
21楼2014-05-28 18:53:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
20楼: Originally posted by 一桶稀泥 at 2014-05-28 18:10:42
你好,全基因合成以后可以转基因吧哈哈...

是完全没有问题的,蛋白质序列对就行
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
22楼2014-05-28 22:41:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白菜吃虫

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-29 13:17:25
那含有28bp片段的基因你是从哪里获得的序列呢?
如果你确信有这个片段,把你实验室的酶全部拿来试一试。
或者你换一对引物试一试。
既然这个基因没有内含子,直接用基因组DNA扩增看看哈。
我以前克隆的基因内部有很多18bp重复,但是都没有缺失过(已知序列,只是克隆验证)。
23楼2014-05-29 11:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuijinmiss

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 一桶稀泥 at 2014-05-28 00:09:37
上游从起始密码子开始一段,下游终子密码子开始的反向互补的一段,应该没问题,另外今天我用3%的胶电泳,发现确实在500以下,我用5个不同品种去pcr,结果都一样,在500一下,说明pcr出了问题,不知道怎么办才好
...

再仔细看看,有没有漏掉碱基?
24楼2014-05-30 09:22:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 一桶稀泥 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +5 Zhao anqi 2026-03-22 5/250 2026-03-22 17:38 by barlinike
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
信息提示
请填处理意见