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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 求加入10 mL的α-淀粉酶(300 U/mL)和糖化酶(15 U/mL)怎么样解释已有2人参与

求大侠给我说下 (称取200mg 淀粉样品置于测试管中,添加15mlpH4.8的0.2 mol/L醋酸钠缓冲液,沸水浴糊化10min,冷却后加入10 mL的α-淀粉酶(300 U/mL)和糖化酶(15 U/mL),置于40℃恒温水浴下振荡(转速为150 r/min)并准确计时。水解20或120min 后取出0.5 mL水解液加4 mL无水乙醇灭酶,然后离心处理后的上清液用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法比色测定产生的葡萄糖含量。)中酶是怎么样配制并加入的,是两种酶分别加10ml?还是将两种酶混合然后共加入10ml?谢谢
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未来的海888

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
淀粉酶和糖化酶是成品的,需要购买的(如果自己配制还需要检测每ml有几个U,我们实验室做实验是在水浴前加淀粉酶主要功能是液化淀粉为糊精或裂解为短支链,在水浴中1.5h,然后冷却至60度,在添加糖化酶的,所以是分别添加的,是每个10ml,因为你的酶单位还是较少,我们实验室淀粉酶4万/ml,只需添加几微升。希望对你有用途。
2楼2014-05-25 15:42:42
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月夜啸狼

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 未来的海888 at 2014-05-25 15:42:42
淀粉酶和糖化酶是成品的,需要购买的(如果自己配制还需要检测每ml有几个U,我们实验室做实验是在水浴前加淀粉酶主要功能是液化淀粉为糊精或裂解为短支链,在水浴中1.5h,然后冷却至60度,在添加糖化酶的,所以是分别 ...

这些酶我都稀释到我需要用的单位了。但是我老板给我找的材料好像是一起添加的吧。那一句话一直看不懂,头大
只要路是对的,就不怕路远
3楼2014-05-25 23:42:19
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晨读

新虫 (小有名气)

分别按照所需酶的总活力来计算
糖化酶,我用的规格是80u/mg     取10mg糖化酶+5mLNaAC缓冲液,160u/mL
猪胰淀粉酶,我用的规格是50u/mg   取60mg+9mLNaAC缓冲液
专注于自己,用心钻研,用心生活!
4楼2014-07-14 09:47:31
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

通常的理解是10ml 淀粉酶和10 ml的糖化酶
其实混合还是不混合都无所谓,只要各个酶的总量对就行,反正就是3000U淀粉酶和150U糖化酶,加多少水只是最终的浓度稍微有些影响罢了
5楼2014-07-15 16:12:43
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