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happyer0

铜虫 (小有名气)

[求助] 请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌? 已有1人参与

看文献说甲烷菌内有F420辅酶,在420,430nm下可发荧光, 是不是要在紫外滤光片下才能直接观察到发荧光的甲烷菌?是活菌才有荧光吗?用另两片(红色和黄色)能不能看到?能不能拿厌氧发酵液直接在荧光下观察?
另外再请问荧光显微镜三个滤光片,是根据什么情况选用?在环境微生物实验中一般哪两个滤光片用得较多?
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tjulxy

铁虫 (初入文坛)

前路艰辛,努力拼搏
2楼2014-05-21 21:46:50
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happyer0

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tjulxy at 2014-05-21 21:46:50
同问

请问您用过荧光显微镜吗?
3楼2014-05-22 12:13:52
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liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
happyer0: 金币+10, ★★★很有帮助, 非常感谢!内行的话就是有针对性 2014-05-23 11:10:31
1. 甲烷菌是有辅酶F420,且能用荧光显微镜观察到荧光。420nm下有荧光激发出,所以应该选择紫外滤光片观察,你描述的没错。
2. 是活菌才能观察,并且因为甲烷菌是严格厌氧菌,所以观察过程尽可能快些,活的甲烷菌能发荧光,但在观察过程中,能看到荧光强度一直在减弱。所以,想取得较好的观察效果,最好在几分钟内完成。
3. 可以取发酵液直接观察,甲烷菌较小,单个菌的荧光较弱,所以,我们观察时,一般用40倍物镜,观察群体的荧光。
4. 其它的滤光片颜色激发波长有直接的关系,在细胞生物学研究中,有红色、绿色、黄色等不同的荧光标记,这时候就可以用不同的荧光滤片了。

祝你实验顺利!
转向地质微生物学
4楼2014-05-23 08:18:25
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happyer0

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liujianmin68 at 2014-05-23 08:18:25
1. 甲烷菌是有辅酶F420,且能用荧光显微镜观察到荧光。420nm下有荧光激发出,所以应该选择紫外滤光片观察,你描述的没错。
2. 是活菌才能观察,并且因为甲烷菌是严格厌氧菌,所以观察过程尽可能快些,活的甲烷菌能 ...

非常感谢您!今天刚刚换了紫外滤光片,取了厌氧发酵液在荧光镜下观察,现在拍下几张照片,请您看看是不是这样的,好吗?
请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌?
1.jpg


请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌?-1
seq0002.jpg


请问如何用荧光显微镜观察甲烷菌?-2
seq0003.jpg

5楼2014-05-23 17:41:03
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liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖

★ ★ ★
happyer0: 金币+3, ★有帮助 2014-05-26 19:52:25
因为甲烷菌发出来的光是蓝绿色,第2张图片是的,1和3也有可能
转向地质微生物学
6楼2014-05-24 22:24:02
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happyer0

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by liujianmin68 at 2014-05-24 22:24:02
因为甲烷菌发出来的光是蓝绿色,第2张图片是的,1和3也有可能

非常感谢!
7楼2014-05-26 19:52:53
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