24小时热门版块排行榜    

查看: 7415  |  回复: 8

朱庆平

铜虫 (小有名气)

[交流] Primer5里面的false priming令人困惑不已 已有5人参与

用Primer5设计上下游引物的时候,感觉下游引物不太合适就编辑了一下,哪知编辑过后,false priming栏目里就出现了一个Most stable dimer,可我仔细瞅了瞅,这个dimer不就是下游引物和我的模板链结合在一起的吗,这怎么算是false呢?而且显示其Delta G是-44kcal/mol,我个人感觉Primer5对该引物false priming的判断是错误的,大家觉得呢?
另外,打开“All”后,还发现了另一个false priming dimer,也就是我编辑过后的引物和模板链其他部位的碱基对应碱基相连接起来了,我就不明白了,我只是把之前的那个下游引物的5’端和3’端各删了一个碱基,难道在我没删那两碱基之前,原本的那个下游引物就不能和模板链的相关部位的碱基连接起来吗?
感觉Primer5有许多地方让我困惑,之前用其设计了一对引物,他们的cross dimer的Delta G是-5.4kcal/mol,而用oligo7检测了后,mixed oligos的Delta G是-2.5kcal/mol,而且两个软件所生成的the most stable dimer的形式都不一样。
软件一只是用来预测的,其正确性一定不是100%,但是Primer5的false priming一栏让我太过困惑,还希望战友们不吝赐教,相互交流,不断进步!
谢过!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2014-05-13 13:01:06
表示设计引物从来不用软件,目测足够了,扩了也有一两百个基因了,从没有失手过
2楼2014-05-12 20:01:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱庆平

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-05-12 20:01:44
表示设计引物从来不用软件,目测足够了,扩了也有一两百个基因了,从没有失手过

深藏不漏的高手啊!
3楼2014-05-12 20:10:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mojx

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-05-12 20:01:44
表示设计引物从来不用软件,目测足够了,扩了也有一两百个基因了,从没有失手过

牛人!
4楼2014-05-16 20:25:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

witness313

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-05-12 20:01:44
表示设计引物从来不用软件,目测足够了,扩了也有一两百个基因了,从没有失手过

好了不起哦!人家请教问题,你显摆个屁啊
5楼2014-07-03 12:06:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by witness313 at 2014-07-03 12:06:43
好了不起哦!人家请教问题,你显摆个屁啊...

呵呵,人家本人都没说啥,关你屁事啊

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-07-04 05:32:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moves757

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

7楼2018-07-01 18:29:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我家叶子

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-05-12 20:01:44
表示设计引物从来不用软件,目测足够了,扩了也有一两百个基因了,从没有失手过

流弊啊!我很纠结pcr引物

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-07-02 18:43:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我家叶子

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-07-03 00:58:54
楼主可以说把问题描述的很清楚了,我之前跟你一样,估计这块改了后算法不一样,觉得改了后看其他项情况是否答标就可以了,还有你说改了后出现非特异性结合,估计你改动了几个碱基就满足了程序算法就显示出有非特异性结合位点

发自小木虫IOS客户端
9楼2018-07-02 18:46:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 朱庆平 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸! 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考博] 26申博 +4 八旬速览 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 211本,11408一志愿中科院277分,曾在中科院自动化所实习 +6 Losir 2026-03-12 7/350 2026-03-17 12:09 by danranxie
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见