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chensuya

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 熬夜上网 at 2014-05-04 12:05:07
基因组的话我倒是遇到过类似情况,非特异性扩增的小片段比较多,造成了整个泳道几乎都是亮的情况。
...

那你后来怎么优化条件的呢?有没有P出来?
还有想问下,PCR扩增后的产物要拿去测序,扩增出来后要做什么处理?没找到相关的操作资料。。。新手求助。。。
当你真心想做一件事,全世界都会联合起来帮助你
11楼2014-05-04 12:13:19
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G3CCTV5

木虫 (著名写手)


把退火温度调高一点儿

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2014-05-04 12:13:20
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chensuya

新虫 (小有名气)

已经53度了,做出来效果差不多

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
当你真心想做一件事,全世界都会联合起来帮助你
13楼2014-05-04 12:25:10
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lairongpeng

银虫 (正式写手)

提高退火温度,减少延伸时间

[ 发自小木虫客户端 ]
14楼2014-05-04 12:30:57
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chensuya

新虫 (小有名气)

嗯嗯,试试!!!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
当你真心想做一件事,全世界都会联合起来帮助你
15楼2014-05-04 12:34:58
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熬夜上网

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by chensuya at 2014-05-04 12:13:19
那你后来怎么优化条件的呢?有没有P出来?
还有想问下,PCR扩增后的产物要拿去测序,扩增出来后要做什么处理?没找到相关的操作资料。。。新手求助。。。...

主要是我的目的条带还算清晰,所以我就没优化方法了。之前我看到有人回你稀释模板,你可以试试,反正大概宗旨就是让模板杂物少一点呗。p以后,连T载,转化,送测吧。应该是这个步骤。

[ 发自小木虫客户端 ]
16楼2014-05-04 13:05:36
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lp198201

新虫 (初入文坛)

减少扩增循环数,降低电压至80V,跑的太丑了,我老板看到这个结果就得给我把胶扔了,另外你的电泳槽尺子厚度太厚,有条件的话可以换成0.5mm厚度,非常漂亮。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

17楼2014-05-04 21:36:49
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chensuya

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
17楼: Originally posted by lp198201 at 2014-05-04 21:36:49
减少扩增循环数,降低电压至80V,跑的太丑了,我老板看到这个结果就得给我把胶扔了,另外你的电泳槽尺子厚度太厚,有条件的话可以换成0.5mm厚度,非常漂亮。

扔了。。。真是中国好老板啊!菜鸟一只,受教了!谢谢!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
当你真心想做一件事,全世界都会联合起来帮助你
18楼2014-05-04 23:11:50
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