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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » PCR产物图 请问是不是DNA模板被污染了？
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chensuya

新虫 (小有名气)

[求助] PCR产物图 请问是不是DNA模板被污染了？ 已有5人参与

学弟做的PCR产物电泳图（没有加marker），怎么改进呢？

PCR产物图 请问是不是DNA模板被污染了？
049A04E0EE0127D3913ADDA7AE178ECC.jpg
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当你真心想做一件事，全世界都会联合起来帮助你
1楼 2014-05-02 10:52:05
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熬夜上网

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by chensuya at 2014-05-04 12:13:19
那你后来怎么优化条件的呢？有没有P出来？
还有想问下，PCR扩增后的产物要拿去测序，扩增出来后要做什么处理？没找到相关的操作资料。。。新手求助。。。...

主要是我的目的条带还算清晰，所以我就没优化方法了。之前我看到有人回你稀释模板，你可以试试，反正大概宗旨就是让模板杂物少一点呗。p以后，连T载，转化，送测吧。应该是这个步骤。

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16楼2014-05-04 13:05:36
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DoRbIr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有拖尾不一定代表被污染了，引物特异性、引物浓度、退火温度、酶浓度等等都可能造成这种问题啊。
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2楼2014-05-02 14:53:21
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先降低模版用量（稀释后用），电泳电压不要太高。还不行，就如楼上所述逐个考虑。
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学习使你立于不败之地
3楼2014-05-02 16:01:02
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cx13033236

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不加maker就不知道P的结果是不是你要的目标片段啊，说什么条件改变都没用。
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4楼2014-05-03 10:22:50
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