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chensuya

新虫 (小有名气)

[求助] PCR产物图 请问是不是DNA模板被污染了? 已有5人参与

学弟做的PCR产物电泳图(没有加marker),怎么改进呢?

PCR产物图 请问是不是DNA模板被污染了?
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当你真心想做一件事,全世界都会联合起来帮助你
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熬夜上网

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by chensuya at 2014-05-04 12:13:19
那你后来怎么优化条件的呢?有没有P出来?
还有想问下,PCR扩增后的产物要拿去测序,扩增出来后要做什么处理?没找到相关的操作资料。。。新手求助。。。...

主要是我的目的条带还算清晰,所以我就没优化方法了。之前我看到有人回你稀释模板,你可以试试,反正大概宗旨就是让模板杂物少一点呗。p以后,连T载,转化,送测吧。应该是这个步骤。

[ 发自小木虫客户端 ]
16楼2014-05-04 13:05:36
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DoRbIr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有拖尾不一定代表被污染了,引物特异性、引物浓度、退火温度、酶浓度等等都可能造成这种问题啊。
2楼2014-05-02 14:53:21
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先降低模版用量(稀释后用),电泳电压不要太高。还不行,就如楼上所述逐个考虑。
学习使你立于不败之地
3楼2014-05-02 16:01:02
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cx13033236

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不加maker就不知道P的结果是不是你要的目标片段啊,说什么条件改变都没用。
4楼2014-05-03 10:22:50
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