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木vs木

金虫 (小有名气)

[求助] 大家有没有遇到这种情况? 已有2人参与

大家有没有遇到过用常规的方法提取质粒做PCR能得到目的条带,用试剂盒提取质粒做PCR没有目的条带,只有质粒的条带,这是为什么呢?
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
木vs木(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-01 10:15:08
没遇到过,另外怎么会有质粒的条带,一般质粒为模板pcr时,模板量相当低,电泳不会显示质粒条带吧

[ 发自小木虫客户端 ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

只有不断地失败才会成功
2楼2014-05-01 00:34:04
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木vs木

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-05-01 00:34:04
没遇到过,另外怎么会有质粒的条带,一般质粒为模板pcr时,模板量相当低,电泳不会显示质粒条带吧

这也是我不明白的!

[ 发自小木虫客户端 ]
坚持就是胜利!
3楼2014-05-01 01:39:57
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zep616745243

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 木vs木 at 2014-05-01 01:39:57
这也是我不明白的!
...

试剂盒提的质粒是否跑过电泳,提的质量如何?质粒PCR模板量我一般都是蘸一下(加0.5ul,目的片段就会有一大坨 )
只有不断地失败才会成功
4楼2014-05-01 08:52:49
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你把这两种情况获得的质粒跑一次电泳试试,也都测一下浓度比较一下。按理说应该都是可以P出来的,除非你传统方法抽的有污染,或者你PCR过程出了问题
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
5楼2014-05-01 10:18:23
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