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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 大家有没有遇到这种情况？
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木vs木

金虫 (小有名气)

[求助] 大家有没有遇到这种情况？已有2人参与

大家有没有遇到过用常规的方法提取质粒做PCR能得到目的条带，用试剂盒提取质粒做PCR没有目的条带，只有质粒的条带，这是为什么呢？
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坚持就是胜利！
1楼2014-04-30 22:41:29
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
木vs木(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-01 10:15:08
没遇到过，另外怎么会有质粒的条带，一般质粒为模板pcr时，模板量相当低，电泳不会显示质粒条带吧

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木vs木
只有不断地失败才会成功
2楼2014-05-01 00:34:04
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木vs木

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-05-01 00:34:04
没遇到过，另外怎么会有质粒的条带，一般质粒为模板pcr时，模板量相当低，电泳不会显示质粒条带吧

这也是我不明白的！

[ 发自小木虫客户端 ]
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坚持就是胜利！
3楼2014-05-01 01:39:57
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zep616745243

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 木vs木 at 2014-05-01 01:39:57
这也是我不明白的！
...

试剂盒提的质粒是否跑过电泳，提的质量如何？质粒PCR模板量我一般都是蘸一下（加0.5ul，目的片段就会有一大坨 ）
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只有不断地失败才会成功
4楼2014-05-01 08:52:49
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你把这两种情况获得的质粒跑一次电泳试试，也都测一下浓度比较一下。按理说应该都是可以P出来的，除非你传统方法抽的有污染，或者你PCR过程出了问题
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
5楼2014-05-01 10:18:23
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