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JICK159

木虫 (正式写手)

[求助] 本人目前遇到连接问题 已有7人参与

本人目前遇到连接问题,载体为枯草pp43nmk 6800bp,基因约1600bp,连接后跑胶多为一万以上的条带,转化后一点都不长,怎么破
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JICK159

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 393658000 at 2014-04-28 09:11:06
首先PstI是有星活性的,你虽然是显示切开了,但是会切坏,那样你肯定是连接不上去。如果可能的话你可以换个酶试试,或者先用O去切PstI,切好以后在纯化切HindIII试试。

我试试看吧,单切的
16楼2014-04-28 10:08:15
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查看全部 18 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
JICK159(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-25 18:50:15
连接以后不需要跑胶啊,直接转化,你这个情况应该就是一次就能连上的啊。你说说你是怎么做的吧

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-25 17:28:42
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JICK159

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-25 17:28:42
连接以后不需要跑胶啊,直接转化,你这个情况应该就是一次就能连上的啊。你说说你是怎么做的吧

我连接后转化一直不长,我去跑胶试试,结果发现时一条大于一万条带
3楼2014-04-25 18:13:48
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你链接了多少?还跑胶?把所有的连接产物全部加进去转化,就出来了,另外,如果12h没有斑,就多长几天,,,,
借口很贱,,,
4楼2014-04-25 18:15:38
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