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uuu555000

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[交流] LIVE/DEAD BacLight 染色能对植物致病真菌孢子染色吗？？

LIVE/DEAD BacLight 染色对植物致病真菌孢子死活染色的原理，
鉴定活的孢子常用哪些染料，鉴定死的孢子常用哪些染料？能否有相关的文献

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无所谓好或不好，人生一场虚空大梦，韶华白首，不过转瞬，惟有天道恒在，往复循环，不曾更改

1楼 2014-04-25 09:04:10

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xiaoamuchong

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
uuu555000: 金币+1 2014-09-22 16:54:47

BACLight染色原理是利用荧光染色剂与细胞核酸结合，使核酸在蓝光的激发下发射荧光，通过测定发射荧光的强度确定样品中活菌水平。所用核酸染色剂为SYTO®9和Propidium iodide（PI，碘化丙啶）。SYTO®9是一种小分子染料，具有良好的细胞膜渗透性，可穿过完好的细胞膜进入到细胞核内与核酸结合并对其染色，在蓝光激发下发射绿色荧光，可以认为SYTO®9能够将带有细胞核的细菌进行染色。PI分子量相对较大，不具有细胞膜渗透性，不能渗透穿过完好的细胞膜，只能进入细胞膜已破坏的细菌细胞并与其核酸结合染色，在蓝光激发下发射红色荧光，可以认为PI只能对死菌（细胞膜被破坏的细菌）进行染色。由于PI比SYTO®9对核酸的亲和力更强，所以被SYTO®9染色的死菌细胞在有PI存在的情况下会重新与PI分子结合，使核酸最终被染红色。当两种染色剂共同作用下的细菌细胞，显绿色荧光的细胞被认为是具完整细胞膜的活菌，而显红色荧光的细胞被认为是细胞膜有破损的死菌。通过这种染色方法，可以简便清晰地分析出活菌在菌液中的比例。