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uuu555000

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[交流] LIVE/DEAD BacLight 染色能对植物致病真菌孢子染色吗??

LIVE/DEAD BacLight 染色对植物致病真菌孢子死活染色的原理,
鉴定活的孢子常用哪些染料,鉴定死的孢子常用哪些染料?能否有相关的文献
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

★ ★
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uuu555000: 金币+1 2014-09-22 16:54:47
BACLight染色原理是利用荧光染色剂与细胞核酸结合,使核酸在蓝光的激发下发射荧光,通过测定发射荧光的强度确定样品中活菌水平。所用核酸染色剂为SYTO®9和Propidium iodide(PI,碘化丙啶)。SYTO®9是一种小分子染料,具有良好的细胞膜渗透性,可穿过完好的细胞膜进入到细胞核内与核酸结合并对其染色,在蓝光激发下发射绿色荧光,可以认为SYTO®9能够将带有细胞核的细菌进行染色。PI分子量相对较大,不具有细胞膜渗透性,不能渗透穿过完好的细胞膜,只能进入细胞膜已破坏的细菌细胞并与其核酸结合染色,在蓝光激发下发射红色荧光,可以认为PI只能对死菌(细胞膜被破坏的细菌)进行染色。由于PI比SYTO®9对核酸的亲和力更强,所以被SYTO®9染色的死菌细胞在有PI存在的情况下会重新与PI分子结合,使核酸最终被染红色。当两种染色剂共同作用下的细菌细胞,显绿色荧光的细胞被认为是具完整细胞膜的活菌,而显红色荧光的细胞被认为是细胞膜有破损的死菌。通过这种染色方法,可以简便清晰地分析出活菌在菌液中的比例。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
2楼2014-04-25 13:04:21
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
个人感觉不太行,细菌是没问题,革兰氏阴性菌和阳性菌都行
环境卫生、微生物学、卫生应急
3楼2014-04-29 11:10:45
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