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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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丫头“笑笑”

银虫 (小有名气)

[求助] 流式细胞术 已有2人参与

我养的是hepg2细胞,因为会有部分团状细胞块,不容易打散。所以如果要做流式的话是不是需要过300目的细胞筛啊?过筛的话应该会损失掉好多细胞吧?
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我要我的自由!
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丫头“笑笑”

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yu756849034 at 2014-04-23 10:25:21
流式细胞仪的吸样的针大小只有100μm,而Hep2细胞大小也就是在20-30μm左右,形成团的话大小只要不大于100就没有问题,但是100是极限大小。我们要做保证能够顺利通过就要把筛的大小控制在70左右,所以200目的筛是比 ...

hepg2细胞不是本来就会抱团生长么?
做流式前不用固定吧?
我要我的自由!
3楼2014-04-23 18:49:57
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yu756849034

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
丫头“笑笑”: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢啊! 2014-04-23 18:48:28
流式细胞仪的吸样的针大小只有100μm,而Hep2细胞大小也就是在20-30μm左右,形成团的话大小只要不大于100就没有问题,但是100是极限大小。我们要做保证能够顺利通过就要把筛的大小控制在70左右,所以200目的筛是比较合适的。 还有你的细胞有成团的现象,那个有两种情况你最好是在这两个方面下点功夫减少下成团现象,因为过筛的话会有细胞损失。这两个方面是:1.细胞在消化的过程中,由于消化不当(比如消化时间过长)产生;2.细胞在流式之前固定的阶段出现的问题,我个人感觉在这个阶段出现问题的几率会大些。在固定的时候要每加一点固定液就要摇匀一下,这样才能有效的避免在这个阶段产生成团现象。
    以后再做流式的时候要注意几十万的仪器哦,可不敢再堵了!祝你好运,有什么问题多多交流!
不作死不会死!!!
2楼2014-04-23 10:25:21
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
小细胞可以用400目过滤,结团的细胞没有分选价值,必须除去。
4楼2014-04-24 11:17:18
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yu756849034

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 丫头“笑笑” at 2014-04-23 18:49:57
hepg2细胞不是本来就会抱团生长么?
做流式前不用固定吧?...

HepG2细胞是单层贴壁生长,长满之后会出现细胞之间相互挨着。普通的细胞会接触抑制,但是肿瘤细胞是无限增殖细胞所以不会出现接触抑制现象。我们在培养细胞的时候如果发现细胞铺展的密度在8成以上时就应该消化传代了。
做流式之前有的需要固定有的不需要固定,我们在用流式做细胞周期时是用的70%的乙醇进行固定的!
不作死不会死!!!
5楼2014-04-24 13:19:35
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