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流式细胞术 已有2人参与
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| 我养的是hepg2细胞,因为会有部分团状细胞块,不容易打散。所以如果要做流式的话是不是需要过300目的细胞筛啊?过筛的话应该会损失掉好多细胞吧? |
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yu756849034
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【答案】应助回帖
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丫头“笑笑”: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢啊! 2014-04-23 18:48:28
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流式细胞仪的吸样的针大小只有100μm,而Hep2细胞大小也就是在20-30μm左右,形成团的话大小只要不大于100就没有问题,但是100是极限大小。我们要做保证能够顺利通过就要把筛的大小控制在70左右,所以200目的筛是比较合适的。 还有你的细胞有成团的现象,那个有两种情况你最好是在这两个方面下点功夫减少下成团现象,因为过筛的话会有细胞损失。这两个方面是:1.细胞在消化的过程中,由于消化不当(比如消化时间过长)产生;2.细胞在流式之前固定的阶段出现的问题,我个人感觉在这个阶段出现问题的几率会大些。在固定的时候要每加一点固定液就要摇匀一下,这样才能有效的避免在这个阶段产生成团现象。 以后再做流式的时候要注意几十万的仪器哦,可不敢再堵了!祝你好运,有什么问题多多交流! ![]() ![]() |

2楼2014-04-23 10:25:21

3楼2014-04-23 18:49:57
jurkat.1640
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yu756849034
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