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最末那抹夕阳

新虫 (初入文坛)

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[求助] 转化后平板不长菌已有7人参与

用的pMD18-T载体，空载体长菌了，control insert也长了，但是长的不多，就是目的片段的连接产物一点都没长，是不是用的PCR反应的taq酶的问题，我用的是LA Taq酶

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1楼 2014-04-21 10:56:29

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引用回帖:

13楼: Originally posted by jukongka at 2014-04-21 23:36:18
楼主这个连接体系没问题，我也常用这样的比例。
最关键的是你的PCR产物回收后浓度如何？电泳3uL看看吧，如果能看到带，应该很好连进去的。
193bp长度，可以用Ex Taq扩增效率会更好, 当然，用LA Taq也行。...

LA Taq能在目的片段末尾加A吗，是不是没连接上