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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 测定酶反应动力学曲线时脂肪酶反应初速度怎样测量
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jlzq9086

新虫 (初入文坛)

[求助] 测定酶反应动力学曲线时脂肪酶反应初速度怎样测量 已有1人参与

我要测定脂肪酶反应动力学曲线，但是反映初速度应该如何测量？是应该按照我测定水解酶活的方法间隔时间取样？
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1楼 2014-04-15 11:09:54
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novodisk

铜虫 (小有名气)
动力学法，反应速度也就是速率的大小对应了酶活的大小，反应快也就是速率高，对应的酶活就高。
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4楼2018-04-25 09:49:19
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果你说动力学曲线是米氏常数 Km, kcat的话
先查你的反应底物的Km值 （查文献，大致预估），然后固定你的酶的浓度，变化你的底物浓度（1/10）Km~10Km，然后拟合求出Kcat和Km
建议参考文献
Biochemistry. 1999 Feb 2;38(5):1547-53.
Kinetic mechanism of metallo-beta-lactamase L1 from Stenotrophomonas maltophilia
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-04-15 21:41:16
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jlzq9086

新虫 (初入文坛)
我不太懂，是分别测定不同底物浓度下酶活吗，我看了一些文献就是不清楚为什么大家测定的是酶活，但是作图时用的数据都是反应速率？
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3楼2014-04-16 15:43:15
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