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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 影响基因枪法转化效率的因素
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xingyun789

金虫 (小有名气)

[求助] 影响基因枪法转化效率的因素 已有2人参与

请问，我用基因枪法来介导目的基因的瞬时表达，所用的指示蛋白为GFP，轰击的是洋葱表皮细胞，前后共做了三次，然而，结果不是很理想，在荧光显微镜下观察到的荧光很弱，而且转化的效率也很低，出现这样的原因有哪些了？有什么解决的办法吗？
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1楼 2014-04-09 16:57:30
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用的载体是什么？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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好好搞学术
2楼2014-04-09 22:58:43
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xingyun789

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lijianfu12 at 2014-04-09 22:58:43
你用的载体是什么？

用的直径1mm的金粉颗粒
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3楼2014-04-10 10:28:20
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by xingyun789 at 2014-04-10 10:28:20
用的直径1mm的金粉颗粒...

那用什么质粒的呢？

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好好搞学术
4楼2014-04-11 00:17:33
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
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4楼: Originally posted by lijianfu12 at 2014-04-11 00:17:33
那用什么质粒的呢？
...

那个打散弹枪似的，效率肯定低，一个位置多打几枪可能会好点

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5楼2014-04-11 06:57:13
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xingyun789

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 06:57:13
那个打散弹枪似的，效率肯定低，一个位置多打几枪可能会好点
...

有一点想请教一下，多打机枪是怎样打法呢？是重新换一套在相同的部位打一次，还是只是更换可裂膜再打一次？谢谢
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6楼2014-04-11 09:27:30
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by xingyun789 at 2014-04-11 09:27:30
有一点想请教一下，多打机枪是怎样打法呢？是重新换一套在相同的部位打一次，还是只是更换可裂膜再打一次？谢谢...

这个方法并不是最好的选择，可以考虑农杆菌侵染

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7楼2014-04-11 10:30:21
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 10:30:21
这个方法并不是最好的选择，可以考虑农杆菌侵染
...

就是重新装样，在同一部位打三次，命中率会高点，但镜检的工作量也很大，还不一定有结果，成本较高

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8楼2014-04-11 10:31:53
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xingyun789

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 10:31:53
就是重新装样，在同一部位打三次，命中率会高点，但镜检的工作量也很大，还不一定有结果，成本较高
...

非常感谢你的解答
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9楼2014-04-14 10:27:42
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