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xingyun789

金虫 (小有名气)

[求助] 影响基因枪法转化效率的因素 已有2人参与

请问,我用基因枪法来介导目的基因的瞬时表达,所用的指示蛋白为GFP,轰击的是洋葱表皮细胞,前后共做了三次,然而,结果不是很理想,在荧光显微镜下观察到的荧光很弱,而且转化的效率也很低,出现这样的原因有哪些了?有什么解决的办法吗?
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用的载体是什么?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
2楼2014-04-09 22:58:43
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xingyun789

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lijianfu12 at 2014-04-09 22:58:43
你用的载体是什么?

用的直径1mm的金粉颗粒
3楼2014-04-10 10:28:20
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by xingyun789 at 2014-04-10 10:28:20
用的直径1mm的金粉颗粒...

那用什么质粒的呢?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
4楼2014-04-11 00:17:33
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by lijianfu12 at 2014-04-11 00:17:33
那用什么质粒的呢?
...

那个打散弹枪似的,效率肯定低,一个位置多打几枪可能会好点

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-04-11 06:57:13
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xingyun789

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 06:57:13
那个打散弹枪似的,效率肯定低,一个位置多打几枪可能会好点
...

有一点想请教一下,多打机枪是怎样打法呢?是重新换一套在相同的部位打一次,还是只是更换可裂膜再打一次?谢谢
6楼2014-04-11 09:27:30
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by xingyun789 at 2014-04-11 09:27:30
有一点想请教一下,多打机枪是怎样打法呢?是重新换一套在相同的部位打一次,还是只是更换可裂膜再打一次?谢谢...

这个方法并不是最好的选择,可以考虑农杆菌侵染

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-04-11 10:30:21
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 10:30:21
这个方法并不是最好的选择,可以考虑农杆菌侵染
...

就是重新装样,在同一部位打三次,命中率会高点,但镜检的工作量也很大,还不一定有结果,成本较高

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-04-11 10:31:53
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xingyun789

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 10:31:53
就是重新装样,在同一部位打三次,命中率会高点,但镜检的工作量也很大,还不一定有结果,成本较高
...

非常感谢你的解答
9楼2014-04-14 10:27:42
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