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旧西圆

新虫 (小有名气)

[求助] 求助 乳腺癌细胞SKBR-3培养 已有2人参与

最近在培养人乳腺癌细胞SKBR-3,细胞是同学去年-80度冰箱冻存的,他说去年他养的时候是好的,培养基用的是ATCC推荐McCoy 5A培养基+10%FBS,离心后放T25瓶培养,4小时以后换液,然后第二天观察细胞大部分都漂浮死亡了。后来按照网上大家推荐把FBS浓度加到15-20%,培养基多加点,不换液,但是1天后看还是不行。有做过支原体检测PCR,没发现支原体,不知道为什么。
有谁养过这类细胞的,求助!谢谢
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冰水静2524

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我养的SKBR就是会飘。。。也长得慢。传说换培养基会导致细胞慢慢变化,不知道是不是,一直没敢换DMEM。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-06-11 14:45:20
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QQ645344381

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

正在养SKBR3,上海细胞库买的种子,状态也不是很好,最大的缺点是生长很慢,很慢。这个细胞的特点就是很难消化,但是小胡后又很那贴壁,之前用过McCoy 5A培养基,感觉不如DMEM好。生长速度慢是这个细胞的特性,消化和复苏以后最好第二天再换液,轻微洗一洗就好,可以多放几天再换液。
2楼2015-06-08 17:02:01
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QQ645344381

新虫 (初入文坛)

用进口胎牛,培养基用1640,感觉细胞很好
4楼2016-04-13 13:32:09
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