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liulugang

木虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-14 10:23:33
你为什么要跑胶呢,直接做转化啊
...

我想用来直接做重组的。。
11楼2014-04-14 16:27:42
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匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
12楼2014-07-25 04:37:43
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-09 09:43:03
可以的,我曾经做过4K与200bp的overlap,设计引物的时候注意点,在设置overlap引物的时候,假设A与B overlap,将A的反向引物设置到60bp,30bp是A上面的,30bp是B上的,B的正向引物是A的反向引物的反向互补序列,也就 ...

你好,我和楼主的片段大小差不多,但是链接不上,目的条带很淡,尝试了很多种条件都不行,能给点意见或建议吗?谢谢
13楼2014-07-31 11:55:51
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liulugang

木虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-07-31 11:55:51
你好,我和楼主的片段大小差不多,但是链接不上,目的条带很淡,尝试了很多种条件都不行,能给点意见或建议吗?谢谢...

我也连不上,建议使用类似infusion的片段组装克隆试剂盒
14楼2014-07-31 18:41:12
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jinzhi2010

银虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-07-31 04:55:51
你好,我和楼主的片段大小差不多,但是链接不上,目的条带很淡,尝试了很多种条件都不行,能给点意见或建议吗?谢谢...

目的条带很淡的话,用小体系多p几管回收增加浓度,我就是这么做的,原来也是都重组不上,后来就成功了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
有所突破~~
15楼2014-08-07 23:23:42
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by jinzhi2010 at 2014-08-07 23:23:42
目的条带很淡的话,用小体系多p几管回收增加浓度,我就是这么做的,原来也是都重组不上,后来就成功了。
...

嗯,我是这么做的,酶切鉴定也对的,只不过现在测序,是失败的,测到一半就停了。很郁闷呢
16楼2014-08-11 21:47:40
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小邹邹

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liulugang at 2014-04-09 12:50:30
您好,是In-Fusion试剂盒吗?这个没用过,还请指导下哈。...

In-Fusion 酶,用起来很好用的,可以试试
既然选择了,就努力做到最好
17楼2015-09-16 10:14:04
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