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琳宝儿128

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于诱变的问题!! 已有2人参与

小女子刚开始做诱变就发现好难做啊!为什么我的紫外诱变和亚硝酸铵诱变结果很奇怪,诱变后的菌株长的比对照都要好!!崩溃啊~致死率算出来都是负的!!求各位大神帮帮忙啊!不然接下来的复合诱变木有办法做啊!!!以下是我操作的全过程,求大家帮我分析一下是什么原因导致的~
紫外诱变:
首先我将我的待诱变菌株用PDB发酵2天,然后吸取发酵液5ML至带玻璃珠的无菌水中震摇1h,然后稀释至10-3倍作为菌悬液。
接着就是分时段照紫外,并且绝对避光进行试验和保存。
亚硝酸钠诱变:
取2mlPH4.4的醋酸缓冲液,加入试管,再加1Ml菌悬液,立即加入1ml亚硝酸钠溶液,摇匀后水浴不同时间后加2ml,PH8.6的磷酸氢二钠,再涂布平板上。

大家帮帮忙啊!!!
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l31661197

铜虫 (初入文坛)

菌悬液的浓度一致吗?建议试试常压室温等离子体诱变,方便、快捷、突变株多
常压室温等离子体(ARTP)诱变育种仪,全自动高通量微生物液滴培养仪
2楼2014-05-13 10:41:00
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琳宝儿128

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by l31661197 at 2014-05-13 10:41:00
菌悬液的浓度一致吗?建议试试常压室温等离子体诱变,方便、快捷、突变株多

一致的呀~老板一定让用这个方法…做了三遍了还是没什么好结果~郁闷呢~

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3楼2014-05-13 12:15:26
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树2979

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心交流! 2014-05-13 17:38:22
没做过诱变!但是可以考虑,发酵液离心弃去上清之后再做诱变,此外,紫外诱变的距离可以考虑一下,离紫外线近一点!或者用于诱变的菌悬液少一点,比如1ml至于平板中,再近距离的紫外诱变,比如1,2,3这样去尝试做致死率曲线等!当然有条件的话也可以尝试楼上他们家卖的室温等离子体诱变啦

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-05-13 13:00:26
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树2979

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2014-05-13 17:38:32
亚硝酸钠的诱变也可以改变浓度,一个一个去尝试,将这两个的致死率曲线做出来,达到诱变的效果就可以为你后面的复合诱变变做基础了,多尝试几次吧

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-05-13 13:03:43
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琳宝儿128

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 树2979 at 2014-05-13 13:00:26
没做过诱变!但是可以考虑,发酵液离心弃去上清之后再做诱变,此外,紫外诱变的距离可以考虑一下,离紫外线近一点!或者用于诱变的菌悬液少一点,比如1ml至于平板中,再近距离的紫外诱变,比如1,2,3这样去尝试做致死 ...

嗯嗯~谢谢啦~我再研究研究~

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-05-14 09:44:23
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Ccpyl2011

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

终止诱变后再培养一段时间后再涂布试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2014-05-14 20:57:20
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琳宝儿128

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Ccpyl2011 at 2014-05-14 20:57:20
终止诱变后再培养一段时间后再涂布试试。

终止后怎么培养啊?能说的详细些么?谢谢啦~

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-05-15 09:34:32
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