北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 807  |  回复: 16
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

swingsinsky

[交流] digest 之后dna消失,找不到原因了,求助

after double digesting with Bamh and NdeI all my dna was gone
1. BSA(10) 3ul, buffer 3 3ul, dH2O 12 ul, DNA 5ul, Bamh 1ul, NdeI 1ul
2. BSA(10) 3ul, buffer 2 3ul, dH2O 12 ul, DNA 5ul, Bamh 1ul, NdeI 1ul
3. BSA(10) 3ul, buffer 3 3ul, dH2O 12 ul, DNA 5ul
4. BSA(10) 1ul, buffer 6 1ul, dH2O 6.5 ul, DNA 2ul, Bamh 0.5ul, NdeI 0.5ul

37C, 1h

after running the gel, I can only find band in 3, which is the control

it's really hard for me to figure it out, because I already changed the amount in 4, and changed different buffers,
and I reduced the digestion time to 1h, so what happened to my DNA? I really need help here. Many thanks!!

plus, I added the BSA buffer and ddwater first, DNA second, and added the enzyme at last
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

totoro一家亲

铜虫 (小有名气)

你用第一种酶做了酶切后没有纯化,做第二种,就降解了?
那你有没有做一个对照,证实你得第二种酶本身没有问题?

那实在不行就分两步做了,纯化后再切,虽然最终的得率会少些,总比都讲解了好呀
16楼2008-03-03 10:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

wangjun0457

银虫 (小有名气)

貌似某种限制酶被DNA水解酶污染。分别用你的BamHI和NdeI单切后找找原因。
2楼2008-02-29 10:50:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swingsinsky

楼上的意思我没有领会
我的RE如果被污染了对dna有影响吗?我看不到任何dna的条带。。。
3楼2008-02-29 11:07:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjiasi

木虫 (正式写手)

会不会是酶切后的片断太小了,当成杂带了?
4楼2008-02-29 12:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求化学调剂 +5 wulanna 2026-03-28 5/250 2026-03-29 23:39 by 飞行日记西
[考研] 290求调剂 +3 dfffsar 2026-03-29 3/150 2026-03-29 22:38 by 毛毛毛阿莫2
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +10 麻辣鱿鱼 2026-03-27 11/550 2026-03-29 21:52 by nanaliuyun
[考研] 085601材料工程找调剂 +14 oatmealR 2026-03-29 15/750 2026-03-29 21:48 by plmuchong
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-29 20:21 by dophin1985
[考研] 考研调剂 +7 小蜡新笔 2026-03-29 7/350 2026-03-29 19:00 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +10 15188958825 2026-03-25 10/500 2026-03-29 17:51 by 王亮_大连医科大
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 6/300 2026-03-29 14:16 by Qshers
[考研] 材料学硕333求调剂 +11 北道巷 2026-03-24 11/550 2026-03-29 08:31 by fmesaito
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 291求调剂 +15 hhhhxn.. 2026-03-23 21/1050 2026-03-28 11:26 by self2008
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
信息提示
请填处理意见