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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » loading buffer里的溴酚蓝和二甲苯箐，想去掉溴酚蓝，我该怎么办？
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

[交流] loading buffer里的溴酚蓝和二甲苯箐，想去掉溴酚蓝，我该怎么办？

哈哈，情景题
买来的DNA loading buffer里面一般都有溴酚蓝和二甲苯箐两种示踪染料。
但是里面的溴酚蓝老是挡住比较小的DNA条带，很讨厌
不用染料也不行，上样看不清
实验室又没有二甲苯箐粉末，我也不想出去借
从这些商业的buffer里，我该如何得到只有二甲苯箐的loading buffer呢？
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1楼 2014-04-01 17:00:38
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
78楼: Originally posted by woolley at 2014-04-02 10:01:57
不知道是不是节日的特殊问题
首先，溴酚蓝只是用来指示用的，告诉你肉眼可见的位置，你在照相的时候用的是紫外线激发的荧光，溴酚蓝又不发光，不会档着你的小条带的。
其次，除非你要做切胶回收，溴酚蓝会使得溶胶 ...

首先，你确定溴酚蓝不会挡住条带？
比如你用3%的胶跑一个80-100bp的条带
或者用6% denaturing PAGE 跑一个25 bp左右的条带
然后，loading dye中还要给点EDTA的，不仅仅是加点甘油或者蔗糖增加密度，尤其是加到做过酶学反应的产物中。
最后，胶的浓度主要是根据要分离的片段大小决定的，如果这样迁就，太得不偿失了。
当然，感谢你有闲心参与，谢谢！
赞一下 回复此楼
79楼2014-04-02 10:29:35
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04010126

铁杆木虫 (知名作家)
★
biostar2009(金币+1): 谢谢参与
帮顶，真的不懂
回复此楼
不以物喜，不以己悲！
6楼2014-04-01 17:23:25
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