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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

[交流] loading buffer里的溴酚蓝和二甲苯箐,想去掉溴酚蓝,我该怎么办?

哈哈,情景题
买来的DNA loading buffer里面一般都有溴酚蓝和二甲苯箐两种示踪染料。
但是里面的溴酚蓝老是挡住比较小的DNA条带,很讨厌
不用染料也不行,上样看不清
实验室又没有二甲苯箐粉末,我也不想出去借
从这些商业的buffer里,我该如何得到只有二甲苯箐的loading buffer呢?
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
78楼: Originally posted by woolley at 2014-04-02 10:01:57
不知道是不是节日的特殊问题
首先,溴酚蓝只是用来指示用的,告诉你肉眼可见的位置,你在照相的时候用的是紫外线激发的荧光,溴酚蓝又不发光,不会档着你的小条带的。
其次,除非你要做切胶回收,溴酚蓝会使得溶胶 ...

首先,你确定溴酚蓝不会挡住条带?
比如你用3%的胶跑一个80-100bp的条带
或者用6% denaturing PAGE 跑一个25 bp左右的条带
然后,loading dye中还要给点EDTA的,不仅仅是加点甘油或者蔗糖增加密度,尤其是加到做过酶学反应的产物中。
最后,胶的浓度主要是根据要分离的片段大小决定的,如果这样迁就,太得不偿失了。
当然,感谢你有闲心参与,谢谢!
79楼2014-04-02 10:29:35
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查看全部 86 个回答

04010126

铁杆木虫 (知名作家)


biostar2009(金币+1): 谢谢参与
帮顶,真的不懂
不以物喜,不以己悲!
6楼2014-04-01 17:23:25
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