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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

[交流] loading buffer里的溴酚蓝和二甲苯箐,想去掉溴酚蓝,我该怎么办?

哈哈,情景题
买来的DNA loading buffer里面一般都有溴酚蓝和二甲苯箐两种示踪染料。
但是里面的溴酚蓝老是挡住比较小的DNA条带,很讨厌
不用染料也不行,上样看不清
实验室又没有二甲苯箐粉末,我也不想出去借
从这些商业的buffer里,我该如何得到只有二甲苯箐的loading buffer呢?
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
34楼: Originally posted by geneyhh at 2014-04-01 18:12:40
这两种东西不仅具有示踪作用,还有其他功能,恐怕去除后DNA跑不好吧!个人观点!

但是,事实是,这个东西真的只有示踪作用。
64楼2014-04-01 20:23:16
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

同志们加油,还有最后一点金币了
就没有一个人想到么?
晚上有空公布真相!
65楼2014-04-01 20:25:53
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
78楼: Originally posted by woolley at 2014-04-02 10:01:57
不知道是不是节日的特殊问题
首先,溴酚蓝只是用来指示用的,告诉你肉眼可见的位置,你在照相的时候用的是紫外线激发的荧光,溴酚蓝又不发光,不会档着你的小条带的。
其次,除非你要做切胶回收,溴酚蓝会使得溶胶 ...

首先,你确定溴酚蓝不会挡住条带?
比如你用3%的胶跑一个80-100bp的条带
或者用6% denaturing PAGE 跑一个25 bp左右的条带
然后,loading dye中还要给点EDTA的,不仅仅是加点甘油或者蔗糖增加密度,尤其是加到做过酶学反应的产物中。
最后,胶的浓度主要是根据要分离的片段大小决定的,如果这样迁就,太得不偿失了。
当然,感谢你有闲心参与,谢谢!
79楼2014-04-02 10:29:35
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+5, MolEPI+1, 鼓励热心回帖并发表独特见解 2014-04-10 09:30:24
内容已删除
83楼2014-04-02 13:09:49
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
82楼: Originally posted by wangweijian at 2014-04-02 12:07:27
自己配不就得了


说好了是情景问题
自己配大家都会
84楼2014-04-02 13:12:53
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