| 查看: 834 | 回复: 2 | ||||
金娜儿新虫 (初入文坛)
|
[求助]
rna电泳 已有2人参与
|
|
RNA变性电泳中1.制备agarose凝胶板：用MOPS～甲醛电极buffer配制1%～1.2%的Agarose，沸水浴融化，冷却至～60℃，铺板，湿度盒中保存备用（不能过夜）。 2.制备样品：3～5μl悬浮溶解的RNA,加样品处理液3～5μl，65℃加热15分钟，冰上冷却，再加3～5μl RNA-loading buffer,混匀，根据RNA浓度确定使用量。 3.上样：将制备样品用10μl移液器小心慢慢的加入样品槽中，不得溢出悬浮。 第二歩的样品处理液是什么？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有195人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
2楼2014-03-31 08:18:42
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10383.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
formaldehyde agarose gel的loading buffer跟普通的RNA denaturing buffer成分差不多，就是多了一个formaldehyde。 我建议你直接配一个这样的loading buffer： 5x RNA loading buffer 16 μl saturated aqueous bromophenol blue solution 80 μl 500 mM EDTA, pH 8.0 720 μl 37% (12.3 M) formaldehyde 2 ml 100% glycerol 3.084 ml formamide 4 ml 10 x FA gel buffer 这个是Qiagen推荐的改良版formaldehyde 5X loading buffer，较传统的2X loading buffer有了很大的改进。 |
3楼2014-03-31 09:35:55