【答案】应助回帖

10楼: Originally posted by seamas_gao1 at 2014-04-03 10:06:23
能否麻烦再问一下，只是两端各测100bp的话，那怎么能把序列测通呢，比如序列片段是400bp的话，中间的200bp不就测不到了吗？是否是先把序列都打碎到不到200bp的长度呢，还麻烦解释一下，谢谢！...

7楼: Originally posted by seamas_gao1 at 2014-04-01 15:40:09
能否麻烦再问一下，只是两端各测100bp的话，那怎么能把序列测通呢，比如序列片段是400bp的话，中间的200bp不就测不到了吗？是否是先把序列都打碎到不到200bp的长度呢，还麻烦解释一下，谢谢！...

12楼: Originally posted by 洛基殿下~ at 2014-04-04 09:50:14
一半都是打断成500、300bp。以你的400bp为例，其实他是没有测通的，只是测了2边的各100bp，然后利用片断与片断之间这100bp序列的重叠关系（因为是DNA是随机打断的）利用生物信息软件拼接起来的。...

11楼: Originally posted by addict_cy at 2014-04-03 11:25:21
考虑到一次测序的片断数目很多（比如5000万个片断），针对一对reads中间测不到的200bp，总会有其他的reads片断覆盖到，这样从全基因来看，基本上每个位置都会有足够的片断覆盖，从而实现对序列的resequencing....

14楼: Originally posted by seamas_gao1 at 2014-04-14 08:56:14
请问测序时用到的“100倍覆盖”，它的意思是不是就是将完整的转录组随机打断100次，之后再进行拼接呢？...

15楼: Originally posted by addict_cy at 2014-04-14 14:22:24
以人的基因组为例，总共３G bp, 如果总测序量是９０G（９０bp*1G reads），则基因组上每个位点平均被覆盖３０次，叫做３０X覆盖；注意这不意味着每个位点都有３０次覆盖，实际上是一个分布；
转录组的话，由于每个 ...

16楼: Originally posted by 洛基殿下~ at 2014-04-14 16:14:45
是的，转录组不讲测序深度，因为转录组的表达量不一样，谈不上平均测序深度。主要看饱和曲线，饱和曲线区域饱和，就表明大部分的转录组被测到，再加大测序量，被测到的转录组数量也不会明显增加。  重测序和基因组这 ...

18楼: Originally posted by seamas_gao1 at 2014-04-15 07:48:09
谢谢啊~...

12楼: Originally posted by 洛基殿下~ at 2014-04-04 09:50:14
一半都是打断成500、300bp。以你的400bp为例，其实他是没有测通的，只是测了2边的各100bp，然后利用片断与片断之间这100bp序列的重叠关系（因为是DNA是随机打断的）利用生物信息软件拼接起来的。...