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小牛石刀

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA提取,怎么老是降解?求指导!! 已有6人参与

最近在提取植物(苜蓿)RNA,用的是博迈德的RNA提取试剂盒,多次提取经过琼胶电泳,条带都很弥散,降解的厉害,求助原因!


     枪头、离心管都是进口的;
     4度离心;
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283503264

银虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-03-28 07:55:44
用agarose gel判断total RNA的完整性,最重要的指标是条带的完整性,也就是说,在28S 18S之间,两者的上下方,有没有弥散性的条带,注意是弥散性而不是很sharp的条带,因为这个取决于你的上样量,你要是跑10μg甚至 ...

多谢多谢 解释的好深刻啊 受益很大

[ 发自小木虫客户端 ]
Action is the food and drink which will nourish my success.
21楼2014-03-28 10:29:31
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dizang2

新虫 (小有名气)

低温提取,depc水

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-03-26 23:39:15
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a315188797

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-03-27 15:12:50
请问你们实验室有荧光PCR仪吗?如果没有的话,就得先普通PCR扩增后才能进行凝胶电泳,不然基本扩增不出来,如果有荧光PCR仪,效果会更好。
3楼2014-03-27 08:32:51
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Hliotrope

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-03-27 15:12:54
还是操作问题吧,RNA酶很多地方都存在,稍不注意就进去了,带口罩,带手套,低温操作,没提过,但是看别人提过,反正比DNA严的多。。。
Someone
4楼2014-03-27 09:05:28
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