24小时热门版块排行榜    

查看: 1444  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wenrongti

新虫 (小有名气)

[求助] 酶反应时,酶的浓度过高会影响底物的紫外吸收吗???及时发金币的。 已有2人参与

细胞破碎之后,离心除去菌体,取上清液,即粗酶液,用粗酶液做参比,在1ml粗酶液中加入适当的底物,再用紫外扫描,发现底物没有吸收峰,基本都是平的,接着我就对粗酶液稀释一定的倍数之后,再加入我的底物,这时就有峰了,我的问题是酶的浓度高时,底物的紫外吸收会受到影响吗???
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

softwind-77

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
wenrongti: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2014-04-01 18:12:50
通常情况下底物与酶反应,需要底物与酶形成瞬间的结合,然后分开,这样一个过程,也就是我们说的酶反应动力学,如果酶与底物的结合域,使得酶正好把底物包裹住,类似于发卡结构,这样的话酶浓度过高就会掩盖了底物的吸光度,还有可能性就是加入的酶过多,导致底物很快被水解完全,所以检测不出来,而稀释之后底物有残留,希望能对楼主有所启示
7楼2014-03-31 20:52:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wenrongti: 金币+3, 有帮助 2014-03-26 19:10:12
wenrongti: 金币+3, 有帮助 2014-03-27 17:47:58
会,但要具体分析你用的什么酶,什么底物,什么产物,什么缓冲液
相信自己
2楼2014-03-26 18:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenrongti

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by l68266152 at 2014-03-26 18:53:03
会,但要具体分析你用的什么酶,什么底物,什么产物,什么缓冲液

但我的参比本身也是粗酶啊,消除了酶对紫外吸收的影响啊,底物还是没有吸收。缓冲液是磷酸盐溶液,酶就是用我的底物诱导的酶,没有细胞破碎之前底物是可以降解的。你能再具体解释下,酶怎么就会对底物的紫外吸收造成影响呢?为什么底物加到粗酶里面扫出来是平的??
3楼2014-03-26 19:10:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l68266152

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wenrongti at 2014-03-26 19:10:03
但我的参比本身也是粗酶啊,消除了酶对紫外吸收的影响啊,底物还是没有吸收。缓冲液是磷酸盐溶液,酶就是用我的底物诱导的酶,没有细胞破碎之前底物是可以降解的。你能再具体解释下,酶怎么就会对底物的紫外吸收造 ...

是做的紫外全波长扫描么?“平的”时候吸光值是多少?
相信自己
4楼2014-03-27 12:33:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:22 by lXgU0RvNTDC9
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 19:22 by lXgU0RvNTDC9
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 19:10 by lXgU0RvNTDC9
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 7/350 2026-08-23 19:10 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 8/400 2026-08-23 18:58 by lXgU0RvNTDC9
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +3 process2012 2026-08-23 4/200 2026-08-23 12:54 by huixian257
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见