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15879003030铜虫 (小有名气)
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请问大家有什么办法可以克服引物产生的高级结构 已有1人参与
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如题，最近PCR发现pcr产物末端 也就是引物的5‘端老有突变，我预计是引物5’端自身有发夹结构，我用Oligo看过，发夹结构的温度只有30度左右，但是实际上不知道为什么产物就是不对，产物PCR效果是很好的，只是末端有突变而已，所以想问问各位大神谁知道有什么办法可以克服引物的二级结构，需要加什么buffer之类的？ 我自己的引物TM是69℃，我退火用的是66度， 68度也用过，能P但依然有突变。 请问大家有什么办法可以克服引物自身产生的高级结构？ |
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