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feilinshiji

银虫 (小有名气)

[求助] RACE能拉出来1.5kb左右的未知序列吗? 已有1人参与

如题,我想获得一个大概3kb左右的未知序列,已知片段是363bp,位于大概1.6-1.9kb处。我没接触过RACE,想请教一下高人,用5‘-RACE和3’-RACE各一个反应能否把这段位置序列拉出来?
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tu475575025

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
feilinshiji: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2014-03-23 23:51:08
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:34:22
race是要看运气的,运气好一步到位,运气差一点,你就要多race几次了。
做侧翼序列延伸,不建议用race的方法。推荐两种方法:
1、seegene 的DNA Walking kit DW ACP-PCR 原理自己去看,国内有代理的公司,就是有点贵,我买了一套花了2500rmb,标准的是可以用10次,自己可以节约一点用30次左右。特点,省时省力,一次延伸较长,延伸特异性和模板的物种有关系,烧钱。
2、YADE(y-shpade Adpator Depenednat Extension)的方法,与race类似,但效果更好,主要是接头上优化,具体的自己去查吧。
3、分析参考序列,设计随机引物
2楼2014-03-23 21:50:35
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