24小时热门版块排行榜

返回列表

feilinshiji

银虫 (小有名气)

应助: 24 (小学生)
金币: 336.9
红花: 2
帖子: 99
在线: 33.5小时
虫号: 1112545
注册: 2010-10-02
性别: GG
专业: 兽医免疫学

[求助] RACE能拉出来1.5kb左右的未知序列吗？已有1人参与

如题，我想获得一个大概3kb左右的未知序列，已知片段是363bp，位于大概1.6-1.9kb处。我没接触过RACE，想请教一下高人，用5‘-RACE和3’-RACE各一个反应能否把这段位置序列拉出来？

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

PCR引物必须与目的基因片段的一小段序列互补吗？急！！！已经有9人回复
RT-PCR 引物序列一样算抄袭吗已经有6人回复
我想在酵母基因组中找一段大概5kb长，CG%<30%的序列，应该如何实现？已经有7人回复
1.5kb的 PCR目的序列GC含量高达67%，引物Tm值达90℃，怎么P比较好？已经有16人回复

1楼 2014-03-23 16:38:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

tu475575025

新虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 5 (幼儿园)
金币: 416.1
红花: 2
帖子: 70
在线: 41小时
虫号: 2003636
注册: 2012-09-15
专业: 生物信息学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
feilinshiji: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2014-03-23 23:51:08
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:34:22

race是要看运气的，运气好一步到位，运气差一点，你就要多race几次了。
做侧翼序列延伸，不建议用race的方法。推荐两种方法：
1、seegene 的DNA Walking kit DW ACP-PCR 原理自己去看，国内有代理的公司，就是有点贵，我买了一套花了2500rmb，标准的是可以用10次，自己可以节约一点用30次左右。特点，省时省力，一次延伸较长，延伸特异性和模板的物种有关系，烧钱。
2、YADE（y-shpade Adpator Depenednat Extension）的方法，与race类似，但效果更好，主要是接头上优化，具体的自己去查吧。
3、分析参考序列，设计随机引物

赞一下