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菌落PCR有目的条带,重组质粒提取PCR却没条带,请问是什么原因?
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菌落PCR有目的条带,重组质粒提取PCR却没条带,请问是什么原因?
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菌落PCR有目的条带,重组质粒PCR却没条带,然后提取质粒跑电泳,也没观察到重组之后大小的目的条带,有很多杂带,请问可能是什么原因啊?
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1楼
2014-03-20 15:54:30
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12楼
:
Originally posted by
三吉草
at 2014-05-07 09:46:36
我最近也出现这样的问题,菌落扩出来都是阳性,而且条带单一,位置正确。菌液也能摇起来,可是扩不出来。按照楼上的分析,是因为连接产物中基因没有连上,沾到菌落上了么?基因浓度过高是不是不利于连接呢?因为我提 ...
他们的意思是菌落PCR不靠谱,污染比较大。我现在是菌落能PCR出来,提取质粒验证也能PCR出来,但是送去测序就不对。阴性对照也没有条带。搞不清楚是个什么状况。
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13楼
2014-05-08 08:44:54
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2014-03-21 08:55:56
使用菌液PCR吧,你转化时的DNA可能占到长得菌落上了,所以PCR时可能会有条带
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2楼
2014-03-20 18:20:54
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2014-03-21 08:56:00
菌落PCR时有污染,重新筛一下,多选几个阳性菌提质粒验证。
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hehe
3楼
2014-03-20 19:34:01
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2楼
:
Originally posted by
1057910381
at 2014-03-20 18:20:54
使用菌液PCR吧,你转化时的DNA可能占到长得菌落上了,所以PCR时可能会有条带
哦,谢谢啦,再去试试。
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4楼
2014-03-21 09:11:44
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