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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 细菌超声破碎之后，破碎液中的酶没有活性。
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wenrongti

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by l01240811 at 2014-03-20 13:23:08
可以电泳验证一下你的酶是否被降解，如果没有，那就是超声破碎时蛋白失活了，注意降低温度，缩短工作时间，或者选择其他温和的裂解方式

工作时间，间歇时间一般设置多少？
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11楼2014-03-20 21:55:31
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wenrongti

新虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by tuobaohua at 2014-03-20 13:05:57
在什么温度下超声破细胞的？是不是低温保护？

是的，在冰浴中超声
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12楼2014-03-20 21:56:04
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wenrongti

新虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by 月夜饮雪 at 2014-03-20 12:45:26
酶是蛋白质，很容易被其他酶水解，或失活。
...

哦，应该不会水解吧
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13楼2014-03-20 21:57:29
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wenrongti

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 月夜饮雪 at 2014-03-20 12:45:26
酶是蛋白质，很容易被其他酶水解，或失活。
...

请问做酶实验可以用全细胞催化吗？就是不用细胞破碎，但是这样的话，酶活当如何进行定量呢？？？
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14楼2014-03-20 21:59:22
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wenrongti

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by l01240811 at 2014-03-20 13:23:08
可以电泳验证一下你的酶是否被降解，如果没有，那就是超声破碎时蛋白失活了，注意降低温度，缩短工作时间，或者选择其他温和的裂解方式

请问做酶实验可以直接用全细胞进行催化吗？就是不用细胞破碎，但是这样的话，酶活当如何进行定量呢？？？
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15楼2014-03-20 22:01:06
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douxx

新虫 (小有名气)
楼主你好，我遇到了相似的问题。

我做的丝状真菌全细胞对我的底物有转化，石英砂研磨破碎之后各个部分都没有转化了

不知楼主是怎么解决这个问题的
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16楼2014-06-23 09:47:50
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