24小时热门版块排行榜    

查看: 3470  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sky_x1227

铁虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白结晶出现疑似晶体结构,后续该如何优化检测 已有5人参与

大家好,我近期做蛋白结晶,最近得到了好多疑似的结果,有的很像结晶,我不知道后续该怎么优化检测之类的,有人说结晶种类多有可能是缓冲体系中的盐结晶了,这个怎么验证呢,一般做蛋白结晶都是怎么确定它是不是你想要的那种结果呢,求高人指点。附件只是其中的两种结果。

蛋白结晶出现疑似晶体结构,后续该如何优化检测
IMG_20140316_083749.jpg


蛋白结晶出现疑似晶体结构,后续该如何优化检测-1
IMG_20140316_083756.jpg


蛋白结晶出现疑似晶体结构,后续该如何优化检测-2
IMG_20140316_085123.jpg


蛋白结晶出现疑似晶体结构,后续该如何优化检测-3
IMG_20140316_085127.jpg
回复此楼
虫子
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky_x1227

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-18 16:54:06
1.用枪反复吹吸晶体就溶解了。蛋白晶通常很脆弱的,轻轻一碰就散了。
2.你的晶体确实很小,所以要多捞一些。
3.铵盐很容易晶体,所以你还是跑个胶确定一下是不是蛋白晶体吧,要不然白优化了。

好的  谢谢你了
虫子
9楼2014-03-18 17:17:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sky_x1227: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2014-03-18 11:05:28
用loop将晶体捞起来,洗干净,跑个晶体电泳就知道了。
2楼2014-03-18 09:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky_x1227

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-18 09:39:03
用loop将晶体捞起来,洗干净,跑个晶体电泳就知道了。

你好,我是初步做这个结晶,不是很懂,这个loop是专业捞晶体的设备吗,还是普通的接种环之类的就行,一般晶体电泳需要多少晶体,我现在做的是48孔坐滴板,点晶样品才点1ul,结出来的晶体够做电泳的吗?
虫子
3楼2014-03-18 09:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sky_x1227 at 2014-03-18 09:51:14
你好,我是初步做这个结晶,不是很懂,这个loop是专业捞晶体的设备吗,还是普通的接种环之类的就行,一般晶体电泳需要多少晶体,我现在做的是48孔坐滴板,点晶样品才点1ul,结出来的晶体够做电泳的吗?...

Loop是专门捞晶体的工具,是一个大约0.05mm-0.4mm的尼龙环。
你先在EP管口加大约20微升结晶池液,然后将晶体捞进去,随后将液滴顺到EP管底,然后4000转离心5分钟,小心的吸去上清液,注意不要碰到晶体。
接下来再加入20微升结晶池液,离心,吸去上清液。反复几次,算是洗晶体。每次清洗液都要留着作对照。
最后你觉得差不多洗干净了,就把晶体融了,然后跑胶。
如果清洗液没有条带,而晶体样有条带,说明晶体是蛋白晶。
希望对你有帮助。
4楼2014-03-18 10:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 12/600 2026-11-09 01:46 by l48hFd8Nwae2
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-09 01:35 by l48hFd8Nwae2
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 11/550 2026-11-09 01:35 by l48hFd8Nwae2
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 01:31 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
请填处理意见