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我是黑宝猪

金虫 (正式写手)

[求助] 帮我看下这个HPLC图,为什么这个峰没有拉下来啊,验证纯度的 已有2人参与

现在是说明这个不是纯品,但是这个峰都没有分开,再纯化难度是不是很大啊

帮我看下这个HPLC图,为什么这个峰没有拉下来啊,验证纯度的
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北京秦方

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的实验条件不行,试着加点缓冲盐或者用梯度吧。
3楼2014-03-17 11:10:02
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fagui168

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 辛苦了 2014-03-17 11:13:32
我是黑宝猪: 金币+5 2014-03-17 15:03:43
你的图不太清晰,条件也没有说明。比较难判断。但是一般的前两个物质离得这么近,是很难分离的。但是只是少量的分离纯化,我觉得还是有可能的。可以换一些柱子试试,再摸索一些更适宜的流动相,如PH、比例、组成啥的因素都要考虑到。我也遇到过这样的情况,后来是通过手性柱子进行分子,也就弄到了一二十毫克。
改变你不能改变的,适应你不能适应的
2楼2014-03-17 10:45:38
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我是黑宝猪

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fagui168 at 2014-03-17 10:45:38
你的图不太清晰,条件也没有说明。比较难判断。但是一般的前两个物质离得这么近,是很难分离的。但是只是少量的分离纯化,我觉得还是有可能的。可以换一些柱子试试,再摸索一些更适宜的流动相,如PH、比例、组成啥的 ...

我用了DEAE-52和G-100,这是过了两根柱子的样品。接下来还要选什么啊
4楼2014-03-17 13:45:55
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我是黑宝猪

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 北京秦方 at 2014-03-17 11:10:02
你的实验条件不行,试着加点缓冲盐或者用梯度吧。

第一个DEAE是梯度洗脱,G-100是缓冲液洗脱。样品就这样了
5楼2014-03-17 13:46:41
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