| 查看: 7084 | 回复: 2 | ||
jill900712金虫 (初入文坛)
|
[求助]
T4 PNK buffer 和T4 ligation buffer可以通用吗 已有1人参与
|
| 请问，T4 ligation buffer 和T4 PNK buffer是通用的吗？前者成分中含有ATP，后者不含ATP。如果将两个oligos 进行phosphorylate and anneal步骤，protocol上是用T4 ligation buffer,NEB公司的人说他们的buffer是可以通用的，可是后者buffer里不含ATP 呀？可以直接用T4 PNK buffer吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有214人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为什么连接这么难呢？
已经有54人回复
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-17 10:33:13
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-17 10:33:13
|
T4 PNK 可以使用T4 DNA 连接酶的buffer T4 PNK本身也需要ATP(或其他三磷酸的如TTP等)，T4 PNK的buffer中不含有ATP，主要是因为T4 PNK常用作放射性标记，所以一般使用的时候会添加放射性的ATP等，buffer中就不加入ATP了，以免影响标记率。 T4 PNK的说明书中(NEB的)明确说明了，如果后续反应是连接反应的话，可以直接在T4 DNA连接酶的buffer中进行T4 PNK的反应。我们也做过测试，没有问题。 |
2楼2014-03-17 10:18:27
guifa zhai
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 145.1
- 帖子: 30
- 在线: 51小时
- 虫号: 8525750
- 注册: 2018-04-14
- 性别: GG
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
3楼2022-01-05 12:39:52
40
