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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于表达载体 转化大肠杆菌 进行扩繁的问题
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yushijiang30

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于表达载体 转化大肠杆菌 进行扩繁的问题 已有3人参与

我有个载体PFGC5941，卡那抗性，已验证正确，但是量太少，想转入大肠杆菌进行扩繁，已经转化了4,5次了，总是长不出菌落，原先是用50微升的感受态加0.5微升的质粒做转化，后又加大了质粒的量，改成3微升做转化，还是转不进去，难道还要加大量吗？
注：有的时候含卡那平板上也长出菌落，比较小，在含卡那的液体培养基中也能繁殖，但就是做菌液pcr验证没有目的条带

[ Last edited by yushijiang30 on 2014-3-16 at 15:45 ]
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1楼 2014-03-16 14:17:34
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yushijiang30

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by delicatepage at 2014-03-17 05:32:30
我觉得可能是哎...

感受态一直在用，没发现什么问题啊， T载体转化都挺好的
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5楼2014-03-17 09:08:23
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
2楼2014-03-16 20:39:10
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delicatepage

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ghqiu09 at 2014-03-16 20:39:10
那会不会是感受态的有问题了呢

我觉得可能是哎
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心里的湖泊，温风吹过
3楼2014-03-17 05:32:30
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yushijiang30

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ghqiu09 at 2014-03-16 20:39:10
那会不会是感受态的有问题了呢

感受态一直在用，没发现什么问题啊， T载体转化都挺好的
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-17 09:07:20
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