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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 求植物组织O2.-的NBT标记实验方法
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冰蓝姬人

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求植物组织O2.-的NBT标记实验方法 已有2人参与

我最近想做植物叶片O2.-的组织化学定位。
我查了好多文献，有的要求0.1%NBT的磷酸缓冲液要有NaN3，有的没有提到NaN3。
NaN3这种物质在该实验中的作用是什么呢？使用该物质的过程中如何做好防护措施呢？不加NaN3可不可以啊？
这个实验用到磷酸缓冲液具体配方是什么啊？

另外如果谁有完整的实验步骤，可以详细告诉我吗？
谢谢哦~
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1楼 2014-03-13 21:50:17
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冰蓝姬人

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 草溪河 at 2014-03-19 08:59:44
叠氮钠好像是一个氧化酶的抑制剂。以前的文献中很少用到叠氮钠，但是近几年的文献中一般都有用到它。关于他没病要进行特殊防护，室温中即可，只是注意保护自己，叠氮钠剧毒。磷酸缓冲液是用磷酸二氢钾和磷酸氢二钾配 ...

为什么还要光照处理啊？我看有的文献说是黑暗抽提。
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4楼2014-03-19 21:20:25
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wenzi6337

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
NaN3有抑菌作用，组化定位没做过
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2楼2014-03-14 18:19:23
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草溪河

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
冰蓝姬人: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢您的回复！ 2014-03-27 20:49:12
叠氮钠好像是一个氧化酶的抑制剂。以前的文献中很少用到叠氮钠，但是近几年的文献中一般都有用到它。关于他没病要进行特殊防护，室温中即可，只是注意保护自己，叠氮钠剧毒。磷酸缓冲液是用磷酸二氢钾和磷酸氢二钾配制成的10 mM的溶液，pH7.8。染色时将样品置于现配的染色液中，真空渗透至样品沉入液底，在将样品连染色液一起光照处理一定时间，知道叶片边缘有蓝黑色一圈。
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3楼2014-03-19 08:59:44
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草溪河

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冰蓝姬人 at 2014-03-19 21:20:25
为什么还要光照处理啊？我看有的文献说是黑暗抽提。...

这个在不同的文献里确实方法也不尽相同，你可以根据自己的实际情况，通过预实验，再确定合适自己的方法
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5楼2014-03-20 21:42:26
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