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冰蓝姬人

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求植物组织O2.-的NBT标记实验方法已有2人参与

我最近想做植物叶片O2.-的组织化学定位。
我查了好多文献,有的要求0.1%NBT的磷酸缓冲液要有NaN3,有的没有提到NaN3。
NaN3这种物质在该实验中的作用是什么呢?使用该物质的过程中如何做好防护措施呢?不加NaN3可不可以啊?
这个实验用到磷酸缓冲液具体配方是什么啊?

另外如果谁有完整的实验步骤,可以详细告诉我吗?
谢谢哦~
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草溪河

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
冰蓝姬人: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢您的回复! 2014-03-27 20:49:12
叠氮钠好像是一个氧化酶的抑制剂。以前的文献中很少用到叠氮钠,但是近几年的文献中一般都有用到它。关于他没病要进行特殊防护,室温中即可,只是注意保护自己,叠氮钠剧毒。磷酸缓冲液是用磷酸二氢钾和磷酸氢二钾配制成的10 mM的溶液,pH7.8。染色时将样品置于现配的染色液中,真空渗透至样品沉入液底,在将样品连染色液一起光照处理一定时间,知道叶片边缘有蓝黑色一圈。
3楼2014-03-19 08:59:44
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草溪河

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 冰蓝姬人 at 2014-03-19 21:20:25
为什么还要光照处理啊?我看有的文献说是黑暗抽提。...

这个在不同的文献里确实方法也不尽相同,你可以根据自己的实际情况,通过预实验,再确定合适自己的方法
5楼2014-03-20 21:42:26
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