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PCR结果不好,胶回收后浓度很低 已有2人参与
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最近在做分子实验,好多东西不清楚,我们实验室之前做化学的,所以也没师兄师姐,老师可以问。 跑了PCR,好像引物二聚体比较严重,拖带,条带不够亮,胶回收之后浓度别低,想问问大家出了什么问题,怎么解决! sulII.gif tetW.gif |
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Neo2000
木虫 (著名写手)
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11楼2014-04-10 12:26:35
【答案】应助回帖
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-13 19:00:01
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| 我的问题:1、你的对照组是哪个?2、胶回收的时候要用大孔点样,如果你是用的第一个图切胶回收,那果断浓度低。3、试剂盒的操作步骤有误,切胶后溶胶时要轻微震荡,不要试剂盒上说多少分钟就多少分钟,一般55℃的时候,5min左右就可以,关键看胶有没有完全融化4、点样时速度要快,要不然样品会弥散的(一般不会。。。除非你点很久)5、提醒你注意一下。。。你跑胶的时间有点长,或者说胶浓度太低,条带最好在胶中间,你的条带都快跑到最下面去了 |
2楼2014-03-13 12:28:24
鬼羽帝魂
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3楼2014-03-13 14:31:49
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