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PCR结果不好，胶回收后浓度很低 已有2人参与
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最近在做分子实验，好多东西不清楚，我们实验室之前做化学的，所以也没师兄师姐，老师可以问。 跑了PCR，好像引物二聚体比较严重，拖带，条带不够亮，胶回收之后浓度别低，想问问大家出了什么问题，怎么解决！  sulII.gif  tetW.gif |
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鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
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- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2014-03-13 14:31:49
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
anmengdy: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-13 15:13:22
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-13 19:00:01
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-13 19:00:01
| 我的问题：1、你的对照组是哪个？2、胶回收的时候要用大孔点样，如果你是用的第一个图切胶回收，那果断浓度低。3、试剂盒的操作步骤有误，切胶后溶胶时要轻微震荡，不要试剂盒上说多少分钟就多少分钟，一般55℃的时候，5min左右就可以，关键看胶有没有完全融化4、点样时速度要快，要不然样品会弥散的（一般不会。。。除非你点很久）5、提醒你注意一下。。。你跑胶的时间有点长，或者说胶浓度太低，条带最好在胶中间，你的条带都快跑到最下面去了 |
2楼2014-03-13 12:28:24
4楼2014-03-13 15:01:15
5楼2014-03-13 15:05:35
30
