10楼: Originally posted by tangbao66 at 2014-03-13 00:22:59
楼主用什么方法转化的！模式菌还是野生菌啊！

9楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2014-03-12 20:54:56
求关于线性质粒重组效率更高的参文，诚谢啊...

12楼: Originally posted by feiyun2006 at 2014-03-18 22:44:08
(1) 从我看的文献来看，环状质粒由于结构的原因多用于单交换；而双交换进行的同源重组则一般采用线状片段。Mol Biol Rep (2010) 37:2207–2213
(2) 效率是不是更高还真不知道，希望多指点指点...

13楼: Originally posted by zhaozhibozhi at 2014-03-19 09:15:47
如果目的片段具左右同源臂，以环状质粒转进目标菌后，是不是先发生单交换，质粒整合到基因组上；然后再发生二次重组，质粒片段丢弃？如果线性质粒的话，是直接进行相当于前述的二次重组？不太懂，求指教。

另： ...

14楼: Originally posted by feiyun2006 at 2014-03-19 14:21:14
我比较赞同你的观点，线状片段只有发生了双交换的才能进行抗性筛选。你们实验室是怎么做芽孢杆菌基因敲除的啊？
  接合转移我没做过。
  ...