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蚊在江湖

银虫 (小有名气)

[求助] WI-38细胞状态不对,求助~ 已有4人参与

在中科院细胞库买了一支WI-38细胞,买来已经长满,消化后感觉形态始终不是很好,
而且消化时细胞不变圆,细胞成团,且消化特别快

有没有有经验的兄弟姐妹给点建议吧
WI-38细胞状态不对,求助~
刚买来的样子
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蚊在江湖

银虫 (小有名气)

消化传代后的形态
WI-38细胞状态不对,求助~-1
传代后.JPG

2楼2014-03-10 09:28:12
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
被支原体污染了。找点支原体清除剂用用吧。
3楼2014-03-10 10:37:29
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duowan17

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
WI-38我养过,说实话该细胞有几个特点,首先是代次不能过高,因为这个细胞系低代次的时候非常好养,只要控制传代密度(密度不能过低)就OK,但是代次(该细胞系不是一传代次数计算代次,而是以细胞数目增殖一倍就算一代)一旦过高,就会出现细胞消化之后形态不规则。至于说该细胞消化过快,这是这个细胞的一个特点,特别容易消化,所以E酶作用时间一定要控制。
4楼2014-03-10 11:23:17
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dodou

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不一定是支原体污染,如楼上所说传代密度过低,我现在在养这个细胞,挡时问给细胞的老师,要我1:2传,偷懒了,冻存后剩下的就随便穿了点,形态和你的一个样,确实不好养!
5楼2014-05-07 11:32:27
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linglingys

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 蚊在江湖 at 2014-03-10 09:28:12
消化传代后的形态

传代后.JPG

楼主,你好,请问你后面怎么解决这个问题,本人最近也遇上这样的状况。
6楼2017-04-17 22:45:26
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

1总爱高倍镜看,看看有污染没,有没有小虫。。。。。。。。。。
国内细胞大多有支原体污染,只要有一只细胞有,冻了液氮那就全有了,如果有钱有时间,够严谨,细胞来了最好测测支原体
2消化细胞,尤其是这种wi-38,好上手好养的,其实消化细胞很关键,它太容易老了,太脆了这细胞。细胞多了,一消化一堆了,再消散了损伤老大了。 稀了,长时间就长,塑料瓶太容易贴壁,久了不好消化,这个自己得摸条件。别扔37度,等个一分钟,漂一片。简单点,加了酶,轻轻晃一晃匀了,看底面,细胞面一发白或不透亮,赶紧弃胰酶。另消化起来就起来了,没起来的就不要了,不要舍不得,不要为了5%不到的贴的牢的细胞把其他的细胞,消得过了,得不偿失
3pd 找计算公式,不是传一瓶就是一代,至于1:2还是1:3,要看你细胞状态,状态好可以适当稀一点,状态差再稀了那就完了
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
7楼2017-04-18 09:21:37
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atto-bio

新虫 (小有名气)

建议使用德国爱拓生物最新推出的含肺组织特异性基质成分细胞培养添加剂,细胞状态会明显改善。
8楼2017-12-08 18:42:54
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