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白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)

[交流] RT反转的时候用的是灭过菌的无菌水,没有用DEPC水,会不会有影响,需要重做吗? 已有13人参与

RT反转的时候用的是灭过菌的无菌水,没有用DEPC水,会不会有影响,需要重做吗?
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木虫 (小有名气)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 15:42:05
引用回帖:
9楼: Originally posted by 白色帝企鹅 at 2014-03-07 22:38:21
我已经PCR完成,电泳条带大小跟目的基因一致,这算不算是成功了,会不会因为RNA酶的缘故导致突变?...

想多点是对的,但是不要瞎想!突变是PCR的酶造成的,有没有突变要看你用的是不是高保真的酶。再说,你构建完了最重要的还有测序啊,一侧就知道了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
13楼2014-03-08 08:50:05
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yiyi12

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2014-03-31 15:40:56
我们向来都是用灭菌水做RT和溶解RNA的。没问题的~
2楼2014-03-07 16:33:58
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唐萌2

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 15:41:03
没问题的,我一直都有的灭菌水
3楼2014-03-07 19:32:51
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 15:41:09
理论上没事,就怕有RNA污染。再一个RNA酶活性较高高温不容易失活。
hehe
4楼2014-03-07 21:15:16
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