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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 噬菌体滴度检测做不出来
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delance

新虫 (初入文坛)

[求助] 噬菌体滴度检测做不出来 已有1人参与

在做NEB的12肽库筛选，目前做到洗脱物扩增后滴度测试这一步，可是怎么都不长噬菌斑。出现全板泛蓝，长很多细小的像菌落一样的东西，LB加了20ug/ml的Tet，不加Tet一个样，而洗脱物扩增之前是完全测试滴度是没问题的，扩增后不长噬菌斑，从10到10的16次方稀释，平板都是泛蓝一层菌苔，什么都没有。
目前用原库做的滴度测试，又是图片这个样子。原库是10的13次方cfu/ml的，取1ul稀释了10-10的10次方倍，仍然看不到明显的噬菌斑，请有经验的同学交流！
噬菌体滴度检测做不出来
20140307-4.JPG


噬菌体滴度检测做不出来-1
20140307-1.JPG


噬菌体滴度检测做不出来-2
20140307-2.JPG


噬菌体滴度检测做不出来-3
20140307-3.JPG
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1楼 2014-03-07 11:39:31
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gm0224

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
dllchina: 金币+2, 鼓励应助 2014-03-11 14:20:37
我感觉是应该再稀释2-3个梯度
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2楼2014-03-10 11:15:29
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张晓雨2013

新虫 (著名写手)
我最近刚在做扩增和滴度测定，原肽库测滴度从你这个图看也不对啊，不会是肽库你没保存好失效了吧？还有你说之前没问题，现在却都做不出来，肯定是你在操作过程中出了问题，既然泛蓝就是肯定有噬菌体，可能是你稀释的倍数太大也说不定呢，不过正常来说你稀释的倍数正好啊，我觉得你应该看看是不是自己操作的问题，和以前有什么不一样。
赞一下 回复此楼
学习和娱乐都要有哦
3楼2014-03-26 15:43:39
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