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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » ATP对蛋白稳定性的影响
汕头大学海洋科学接受调剂
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笔冰河

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 10:41:36
举个例子啊：
假如我在pH7.0的缓冲液中分别准备蛋白和核酸。蛋白是碱性的，等电点9.0；核酸是酸性的，等电点是5.0。
此时他们都能溶解：等电点9.0的蛋白在7.0的缓冲液中带正电；等电点5.0的核酸在7.0的缓冲液中带 ...

复合物的等电点是蛋白质和核酸等电点的平均值吗？
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11楼2014-03-07 10:56:37
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笔冰河

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 10:41:36
举个例子啊：
假如我在pH7.0的缓冲液中分别准备蛋白和核酸。蛋白是碱性的，等电点9.0；核酸是酸性的，等电点是5.0。
此时他们都能溶解：等电点9.0的蛋白在7.0的缓冲液中带正电；等电点5.0的核酸在7.0的缓冲液中带 ...

我之前有做过只加蛋白和tRNA做binding，混合后不是很稳定，逐渐变浑，但如果我加入ATP（pH~7），复合体就稳定了，很清澈。。。
这个时候是因为加入的ATP又改变了整个复合体的等电点使之稳定了吗？
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12楼2014-03-07 10:59:36
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)
1.复合物等电点不一定是两者等电点的平均值，因为滴定曲线本身就不是线性的，我之前的例子就是打个比方而已。
2.有可能是你说的那样，但是不能肯定，也有可能是有构象变化什么的。

看你的问题，我感觉我们是同行中的同行啊。。。
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13楼2014-03-07 12:42:34
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笔冰河

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 12:42:34
1.复合物等电点不一定是两者等电点的平均值，因为滴定曲线本身就不是线性的，我之前的例子就是打个比方而已。
2.有可能是你说的那样，但是不能肯定，也有可能是有构象变化什么的。

看你的问题，我感觉我们是同行 ...

恩，我之前认为的是ATP的加入使活性位点构象发生了变化，稳定了蛋白tRNA复合体，激活了反应
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14楼2014-03-07 12:45:51
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笔冰河

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 12:42:34
1.复合物等电点不一定是两者等电点的平均值，因为滴定曲线本身就不是线性的，我之前的例子就是打个比方而已。
2.有可能是你说的那样，但是不能肯定，也有可能是有构象变化什么的。

看你的问题，我感觉我们是同行 ...

哈哈，我以为你是做电化学的专家呢，原来你也是做RNA与蛋白复合物呀
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15楼2014-03-07 12:46:36
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笔冰河

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 12:42:34
1.复合物等电点不一定是两者等电点的平均值，因为滴定曲线本身就不是线性的，我之前的例子就是打个比方而已。
2.有可能是你说的那样，但是不能肯定，也有可能是有构象变化什么的。

看你的问题，我感觉我们是同行 ...

不知道蛋白的结构的情况下，很难确定它的表面带电，都不好确定应该在什么样的pH条件下进行binding实验了，看样子以后ATP,tRNA 溶液都得调pH到中性再用了，之前没想到酸性这么大，都只是用tri-HCl或Hepes配制后直接用。
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16楼2014-03-07 12:50:29
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 笔冰河 at 2014-03-07 12:50:29
不知道蛋白的结构的情况下，很难确定它的表面带电，都不好确定应该在什么样的pH条件下进行binding实验了，看样子以后ATP,tRNA 溶液都得调pH到中性再用了，之前没想到酸性这么大，都只是用tri-HCl或Hepes配制后直接 ...

呵呵，常交流吧！
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17楼2014-03-07 14:04:11
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笔冰河

银虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 14:04:11
呵呵，常交流吧！...

恩，好的，多谢你的帮助
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18楼2014-03-08 22:48:24
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