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笔冰河

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 10:41:36
举个例子啊:
假如我在pH7.0的缓冲液中分别准备蛋白和核酸。蛋白是碱性的,等电点9.0;核酸是酸性的,等电点是5.0。
此时他们都能溶解:等电点9.0的蛋白在7.0的缓冲液中带正电;等电点5.0的核酸在7.0的缓冲液中带 ...

复合物的等电点是蛋白质和核酸等电点的平均值吗?
11楼2014-03-07 10:56:37
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笔冰河

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 10:41:36
举个例子啊:
假如我在pH7.0的缓冲液中分别准备蛋白和核酸。蛋白是碱性的,等电点9.0;核酸是酸性的,等电点是5.0。
此时他们都能溶解:等电点9.0的蛋白在7.0的缓冲液中带正电;等电点5.0的核酸在7.0的缓冲液中带 ...

我之前有做过只加蛋白和tRNA做binding,混合后不是很稳定,逐渐变浑,但如果我加入ATP(pH~7),复合体就稳定了,很清澈。。。
这个时候是因为加入的ATP又改变了整个复合体的等电点使之稳定了吗?
12楼2014-03-07 10:59:36
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

1.复合物等电点不一定是两者等电点的平均值,因为滴定曲线本身就不是线性的,我之前的例子就是打个比方而已。
2.有可能是你说的那样,但是不能肯定,也有可能是有构象变化什么的。

看你的问题,我感觉我们是同行中的同行啊。。。
13楼2014-03-07 12:42:34
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笔冰河

银虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 12:42:34
1.复合物等电点不一定是两者等电点的平均值,因为滴定曲线本身就不是线性的,我之前的例子就是打个比方而已。
2.有可能是你说的那样,但是不能肯定,也有可能是有构象变化什么的。

看你的问题,我感觉我们是同行 ...

恩,我之前认为的是ATP的加入使活性位点构象发生了变化,稳定了蛋白tRNA复合体,激活了反应
14楼2014-03-07 12:45:51
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笔冰河

银虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 12:42:34
1.复合物等电点不一定是两者等电点的平均值,因为滴定曲线本身就不是线性的,我之前的例子就是打个比方而已。
2.有可能是你说的那样,但是不能肯定,也有可能是有构象变化什么的。

看你的问题,我感觉我们是同行 ...

哈哈,我以为你是做电化学的专家呢,原来你也是做RNA与蛋白复合物呀
15楼2014-03-07 12:46:36
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笔冰河

银虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 12:42:34
1.复合物等电点不一定是两者等电点的平均值,因为滴定曲线本身就不是线性的,我之前的例子就是打个比方而已。
2.有可能是你说的那样,但是不能肯定,也有可能是有构象变化什么的。

看你的问题,我感觉我们是同行 ...

不知道蛋白的结构的情况下,很难确定它的表面带电,都不好确定应该在什么样的pH条件下进行binding实验了,看样子以后ATP,tRNA 溶液都得调pH到中性再用了,之前没想到酸性这么大,都只是用tri-HCl或Hepes配制后直接用。
16楼2014-03-07 12:50:29
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 笔冰河 at 2014-03-07 12:50:29
不知道蛋白的结构的情况下,很难确定它的表面带电,都不好确定应该在什么样的pH条件下进行binding实验了,看样子以后ATP,tRNA 溶液都得调pH到中性再用了,之前没想到酸性这么大,都只是用tri-HCl或Hepes配制后直接 ...

呵呵,常交流吧!
17楼2014-03-07 14:04:11
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笔冰河

银虫 (小有名气)

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17楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-07 14:04:11
呵呵,常交流吧!...

恩,好的,多谢你的帮助
18楼2014-03-08 22:48:24
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