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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做了一晚上的5'race，结果这样，该何去何从，求指点
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邂逅星期八

金虫 (正式写手)

[求助] 做了一晚上的5'race，结果这样，该何去何从，求指点 已有5人参与

本次5'race用的是invitrogen的5'race试剂盒，RNA是上午提取的，-80℃保存，晚上做的5’race，巢式PCR第一次得到图一的弥散条带，第二次得到图二，基本看不到条带，是不是失败了呢？可能的原因又有哪些呢？
做了一晚上的5'race，结果这样，该何去何从，求指点
图一.jpg


做了一晚上的5'race，结果这样，该何去何从，求指点-1
图二.jpg
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青春就要在路上
1楼 2014-02-28 15:00:32
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baolingmu123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问，做巢式pcr，又要做5’race，是不是原始的序列与其他序列同源性特别高，才这样做的啊？我最近也遇到了这样的问题，有人建议我做巢式pcr，还有人建议我做3‘race。
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13楼2015-09-18 21:47:12
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Easony

至尊木虫 (知名作家)

老顽童

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
邂逅星期八: 金币+2 2014-03-01 13:14:35
这么不清晰肯定失败了。。。
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自信，坚持，善良，真实，简单生活，敢爱敢恨！
2楼2014-02-28 15:24:12
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邂逅星期八

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Easony at 2014-02-28 15:24:12
这么不清晰肯定失败了。。。

第一次的时候是弥散条带 按说第二次不应该会好些么 失败原因可能有哪些呢
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青春就要在路上
3楼2014-02-28 15:28:34
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
你这试剂盒的原理是什么啊？跟我的有点不一样
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
4楼2014-02-28 16:44:57
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