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邂逅星期八

金虫 (正式写手)

[求助] 做了一晚上的5'race,结果这样,该何去何从,求指点 已有5人参与

本次5'race用的是invitrogen的5'race试剂盒,RNA是上午提取的,-80℃保存,晚上做的5’race,巢式PCR第一次得到图一的弥散条带,第二次得到图二,基本看不到条带,是不是失败了呢?可能的原因又有哪些呢?
做了一晚上的5'race,结果这样,该何去何从,求指点
图一.jpg


做了一晚上的5'race,结果这样,该何去何从,求指点-1
图二.jpg
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青春就要在路上
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

你这试剂盒的原理是什么啊?跟我的有点不一样
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
4楼2014-02-28 16:44:57
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Easony

至尊木虫 (知名作家)

老顽童

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
邂逅星期八: 金币+2 2014-03-01 13:14:35
这么不清晰肯定失败了。。。
自信,坚持,善良,真实,简单生活,敢爱敢恨!
2楼2014-02-28 15:24:12
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邂逅星期八

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Easony at 2014-02-28 15:24:12
这么不清晰肯定失败了。。。

第一次的时候是弥散条带 按说第二次不应该会好些么 失败原因可能有哪些呢
青春就要在路上
3楼2014-02-28 15:28:34
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邂逅星期八

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-28 16:44:57
你这试剂盒的原理是什么啊?跟我的有点不一样

以mRNA为模板,利用特异性引物GSP1合成cDNA,把mRNA讲解掉,纯化cDNA,然后在cDNA3'端加上CCCC..,在利用自己的特异性引物GSP2 GSP3和它提供的引物进行PCR扩增
青春就要在路上
5楼2014-02-28 17:00:27
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