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蝶影拂袖

银虫 (小有名气)

[求助] 用大肠杆菌BL21养蛋白时菌体总是结成块状怎么办!!! 已有3人参与

用BL21养一个内源蛋白,之前用LB养的时候OD正常,只是表达量不高,还是可以纯化出来;但是现在改用M9养,怎么也摇不起来,菌体都在瓶底结成团,上清很澄清,结成的菌块使劲摇可以摇散。用的M9培养基pH7.0,尝试过增大摇床转速到270~300rpm和用大瓶子摇少量菌液,都没有解决问题,确定不是噬菌体污染,同批的表达其他蛋白的菌很正常~小女纸求各位大神指点!!!
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖


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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流! 2014-02-26 09:23:24
应该是培养的条件不太合适吧,有没有在瓶子中加入玻璃珠?
表达蛋白是碱性蛋白么?如果是就比较难处理
2楼2014-02-25 20:48:41
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