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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » siRNA转染过程中，用10%FBS培养基会影响转染效率吗
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倩女

金虫 (正式写手)

[求助] siRNA转染过程中，用10%FBS培养基会影响转染效率吗 已有2人参与

最近在做细胞的siRNA转染，之前实验室转染过程中都用无血清培养基孵育24h，然后再换10%FBS培养基。因为我的细胞在无血清条件下，状态不好，会缩小，所以没有用无血清培养基，直接采用的是10%FBS，目前出现的问题就是，细胞在24h转染过程中，生长速度比较快，这样的状况会影响到转染效果吗？
求大牛帮帮忙！
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1楼 2014-02-25 16:31:05
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
倩女: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-02-26 10:37:53
配制lip2000和siRNA时无血清，培养时可以加血清。
如果要让细胞长慢点就用5%血清。
我用含FBS的培养基配过lip2000，貌似转染率不降低（可能还增高）
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7楼2014-02-26 09:35:32
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人认为应该采用5%的FBS，在转染过程中3h更换一次培养基，可以提高转染效率。
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2楼2014-02-25 16:44:59
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倩女

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-02-25 16:44:59
个人认为应该采用5%的FBS，在转染过程中3h更换一次培养基，可以提高转染效率。

你之前这么做过吗，我问了转染试剂公司他们说血清是不影响转染效率的
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3楼2014-02-25 16:48:54
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
倩女: 金币+3, ★★★很有帮助, 多谢 2014-02-25 17:06:47
说血清不影响转染效率是不负责任的话。转染是需要一定的细胞密度的对吧，所以我建议还是低浓度的FBS和转染过程中更换几次培养基。
大多数培养基在使用前需要加血清。胎牛血清（FCS）经常用到，便宜一点的有马或牛血清。 通常的，血清是一种包含生长因子及其它辅助因子的不确切成分的添加物，对不同细胞的生 长作用有很大的差别。血清质量的变化直接影响转染效率。因此在转染前建议先测试出对细胞生长良好的血清批号，转染时用同一批号的血清，并同时做负对照（不加转染试剂及外源DNA）以测试细胞生长是否正常。有些转染技术如脂质体转染在有血清存在情况下 效率很低，因此在转染前要除血清。但有些对此敏感的细胞如原代细胞会受到损伤，甚至死 亡导致转染效率极低。
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4楼2014-02-25 17:00:11
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