24小时热门版块排行榜    

查看: 3416  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1989zb

金虫 (小有名气)

[求助] 肝细胞培养问题! 已有2人参与

有没有人知道,做肝细胞,怎么除去里面的脂肪呢??刚分离出来的肝细胞,还很多,第二天就很少了 还不怎么贴壁,这是什么原因呢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ifyousee

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by 1989zb at 2014-03-04 10:20:04
我培养的是鸭胚肝细胞  你培养过吗〉〉??有些想纤维状  后面分离出来培养类圆形  是不是前面两张的纤维状的不是呢??我看有的文章里面说鸭胚肝细胞会生长,几天后变成梭状……...

细胞形态这东西,不同的培养液,不同的血清,不同的温度、pH,都不一样的
14楼2014-03-05 23:40:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

ifyousee

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
1989zb: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-02-25 16:52:19
我长期从事鱼类各种组织细胞的原代培养。大黄鱼、欧洲鳗鲡、日本鳗鲡、眼斑拟石首鱼的肝脏都是有培养过的。最终也能成功建细胞系。肝细胞原代培养的确看起来非常脏
首先很重要的是你们用的是什么动物的肝脏。其次培养基、培养温度、CO2、培养条件等等的。
关于肝脏培养的方法有很多,我最喜欢用的有两种:组织块干贴和胰酶消化组织块悬液两种办法,各有优缺点吧。
培养肝细胞里面飘着的“脂肪”状的杂质的确很多,但是根据我原代培养的经验其实这些杂质是没有影响的。
2楼2014-02-25 12:26:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1989zb

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ifyousee at 2014-02-25 12:26:09
我长期从事鱼类各种组织细胞的原代培养。大黄鱼、欧洲鳗鲡、日本鳗鲡、眼斑拟石首鱼的肝脏都是有培养过的。最终也能成功建细胞系。肝细胞原代培养的确看起来非常脏
首先很重要的是你们用的是什么动物的肝脏。其次培 ...

嗯 我培养的是鸭胚肝细胞,就是刚分离出来的肝细胞在细胞瓶里面 看着很浑浊,,还想着怎么去除那类似脂肪的东西  刚分离出来细胞瓶里面还是很多,过了几个小时在看,就很少了  
请教哈你用胰酶消化胰酶的浓度以及消化时间是多少呢??
可以把你的方法给我一份吗?
3楼2014-02-25 16:52:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ifyousee

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1989zb at 2014-02-25 16:52:08
嗯 我培养的是鸭胚肝细胞,就是刚分离出来的肝细胞在细胞瓶里面 看着很浑浊,,还想着怎么去除那类似脂肪的东西  刚分离出来细胞瓶里面还是很多,过了几个小时在看,就很少了  
请教哈你用胰酶消化胰酶的浓度以及 ...

胰酶消化装到15mL离心管或是2mL EP管中,过个5分钟晃动一下,成乳糜状就可以了,觉得杂质多100目的筛绢过滤一下。飘在上面的脂肪15mL离心管1000rpm离个5min密度较轻的那一层基本是飘在上面的。但是也别指望去太干净。另外脂肪我觉得是真没有影响。
4楼2014-02-27 10:02:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 4/200 2026-09-01 06:06 by o3EMxHUAQDtS
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 5/250 2026-09-01 05:56 by o3EMxHUAQDtS
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 5/250 2026-09-01 05:43 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
请填处理意见